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Fluorochorome荧光金(Fluoro-Gold)抗体的使用方法

点击次数:0发布时间:2023/2/6 16:51:24

Fluorochorome荧光金(Fluoro-Gold)抗体的使用方法

更新日期:2023/2/6 16:51:24

所 在 地:中国大陆

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简单介绍:荧光金(Fluoro-Gold)抗体是一种在兔体内培养的多克隆抗体。小瓶将含有约100μl的抗体溶液。

相关标签:荧光金 

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详细内容

 艾美捷Fluorochorome荧光金(Fluoro-Gold)抗体的储存和制备

您将在一个小药瓶中收到荧光金抗体。这是一种在兔体内培养的多克隆抗体。小瓶将含有约100µl的抗体溶液。您不会收到冷冻的抗体,但应立即冷冻并储存在寒冷(-20ºC)、黑暗、干燥的环境中。一旦溶液解冻以准备工作滴定度,不要再冷冻溶液。一台好的商用冰箱的冷冻部分,没有防冻功能,应该足够了。如果适当且连续冷冻,抗体溶液可储存长达一年。

 

抗体溶液应保持冷冻,直到可以使用。100µl抗体等分试样的稀释度为1/100。抗体可在BSA稀释剂(50mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS)中进一步稀释1/50000至1/100000倍,以产生50ml至100ml的工作效价。这意味着你可以将收到的溶液稀释500至1000倍。

 

如果您使用Vector精英套件,这将治疗300至1000个切片。制备后,抗体溶液可在凉爽(4ºC)、黑暗和干燥的环境中储存长达七天。好的商用冰箱的冰箱部分应该足够了。不建议在配制后七天内使用该溶液。

 

Fluorochorome荧光金(Fluoro-Gold)抗体的使用

氟金可以用几种不同的方法注射,包括压力法、离子电渗法和各种研究人员开发的其他应用。参见Schmued和Fallon,Fluoro-Gold:“一种具有众多独特财产的荧光逆行轴突示踪剂”,《大脑研究》,377(1986)147-154,以及Pieribone和Aston-Jones,“荧光金在深部脑核传入研究中的离子导入应用”,《脑研究》,475(1988)259-271。许多研究人员开发了自己的改进程序。抗体的使用不应依赖于使用荧光金的方法。

 

注射Fluoro Gold后,将漂浮切片(使用了灌注了4%甲醛的大鼠的30μm切片)与Fluoro金抗体溶液在4℃下孵育过夜。将切片清洗,然后在生物素化GAR(Vector Labs)中以1/1000在室温下孵育1小时,然后再次清洗。然后将切片在Avidin/Biotin(Vector Labs)中以1/1000孵育1小时,洗涤并转移至二氨基联苯胺(.04%)和氯化镍(2.5%)中的0.1M乙酸钠和0.06%H2O2中6分钟。然后清洗、安装、干燥、脱水并盖上盖子。

 

根据经验,如果按照上述方式储存和制备,如果您使用Vector精英试剂盒,每小瓶抗体应处理300至1000个30μm的白化大鼠脑(或类似大小的动物)切片。然而,您应该尝试集中注意力和程序,以确定哪一个适合您的环境。

 

荧光金(Fluoro-Gold)抗体根据不同规格分为单管和二管:

荧光金抗体-单管/100ul(FC20001)

荧光金抗体-2管/2x100ul(FC20002)

 

来源:https://www.amyjet.com/featured/Fluorochrome-Fluoro-Gold.shtml

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