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人激肽释放酶11(KLK11)ELISA试剂盒
点击次数：45发布时间：2017/3/31 20:22:52
更新日期：2017/3/31 20:22:52
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
产品规格：48T/96T
检测方法： ELISA酶联免疫法
说 明 书：随货发送，也可直接联系在线销售索取
测试种属：人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、猪、鸡、鸭elisa试剂盒等种属
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
试剂盒保存及有效期：2-8℃,避光保存:6个月。
产品产地：进口/国产
产品库存：现货供应
品牌：自主研发/进口原装
产品价格：价格优惠，欢迎来电洽谈！
试剂盒使用范围：仅供科研检测,不得用于临床.
产品价格：价格优惠,欢迎来电洽谈！
酶联免疫法试剂盒定性定量检测一步到位，可同时大批量完成多种属的检测工作，而且一天之内可以检查几百甚至上千份标本，正规专业的我们，一定能帮您，将实验做得更好，更精确。试验过程中，如有任何疑问都可和我们联系，无论是售前、售中、售后我们都将始终如一，将优质服务进行到底。
供应商：上海繁旌生物科技有限公司
上海繁旌生物ELISA试剂盒独特优势:
1、采用全进口原料和抗体：高效、灵敏、特异，严格引进技术标准进行批量生产。
2、的优化方案：重复性高，可靠性。
3、技术服务:专业，及时，耐心。
4、现货供应:江浙沪隔天到货，外地3-5天到货。
本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关
液体样本中激肽释放酶 1(KLK-1)的含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人激肽释放酶 1(KLK-1)水平。用纯化的人激肽释
放酶 1(KLK-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入激肽释放酶
1(KLK-1)，再与 HRP 标记的激肽释放酶 1(KLK-1)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合
物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作
用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的激肽释放酶 1(KLK-1)呈正相关。用酶标仪
在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人激肽释放酶 1(KLK-1)
浓度。
试剂盒组成：
试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存
说明书 1 份 1 份
封板膜 2 片（48） 2 片（96）
密封袋 1 个 1 个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品：27ng/ml 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
显色剂 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
显色剂 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
20 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 30ml×1 瓶 2-8℃保存
样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上
清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心
20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次
离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程
中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/
1分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞
浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分
钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS（PH7.4），用手工或匀浆器
将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待
检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上
进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10 孔，在、第二孔中分别加标
准品 100µl，然后在、第二孔中加标准品稀释液 50µl，混匀；然后从孔、第二
孔中各取 100µl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50µl，
混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 50µl 弃掉，再各取 50µl 分别加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各
取 50µl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50µl，混
匀后从第七、第八孔中分别取 50µl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准
品稀释液 50µl，混匀后从第九第十孔中各取 50µl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50µl，
浓度分别为 18ng/ml，12ng/ml，6ng/ml，3ng/ml， 1.5 ng/ml）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样
品*终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混
匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间
控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值
大于标准品孔孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计
算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
计算：
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，
在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD
值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释
倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值
代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释
倍数，即为样品的实际浓度。
（此图仅供参考）
试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值为 0.990 以上。
2.批内与批见应分别小于 9%和 11%
检测范围：
0.8ng/ml – 20ng/ml
保存条件及有效期：
1.试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月
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