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公司动态

过表达干扰慢病毒包装服务

点击次数:569 发布时间:2018/1/17
 徕创生物服务简介

慢病毒具有广泛的感染谱,可以有效感染分裂期和静止期的细胞,并且能够长期稳定表达外源基因,因而成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、基因干扰以及活体动物实验中。

服务内容:慢病毒包装的基因涉及常规的蛋白编码基因及非编码基因,比如:miRNA、lncRNA以及circularRNA等的过表达及干扰的慢病毒包装服务。
慢病毒包装服务价格与周期

服务编号

病毒滴度

规格

赠送阴性对照

价格

周期

LC1033

过表达慢病毒

过表达慢病毒,病毒滴度>10^8PFU/ml

1ml(>10^8PFU/ml)

询价

6-8周

LC1034

干扰慢病毒

过表达慢病毒,病毒滴度>10^8PFU/ml

1ml(>10^8PFU/ml)

询价

6-8周

 

慢病毒包装服实验流程

a. 慢病毒过表达质粒载体的构建: 根据目的基因序列设计特异性扩增引物,采用高保真PCR技术从模板中调取目的基因CDS区连入核心载体。

b. 慢病毒干扰质粒载体的构建:合成目的基因的siRNA序列,退火成双链,然后连入慢病毒干扰质粒载体。

c. 非编码基因过载体构建:从模板中调取基因相应的miRNA前体, 然后连入慢病毒核心质粒(miRNA以基因组为模板,lncRNA和circularRNA根据需要可以用cDNA或基因组为模板)。

d. 慢病毒载体的包装与浓缩纯化: 核心质粒和辅助质粒进行高纯度无内毒素抽提,共转染293T细胞,转染后8h 更换为完全培养基,培养48和72h后,分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清,病毒上清液通过超离心浓缩病毒。
服务流程:
慢病毒包装

徕创客户须知

1、适用于在难以转染的细胞中进行的基因过表达或干扰研究,如原代神经细胞,干细胞,肿瘤细胞等;

2、适用于快速建立稳定表达的特定基因细胞株;

3、适用于In vivo 实验,包括稳定表达细胞株成瘤实验、局部注射、活体动物的基因过表达或干扰等。

徕创生物服务承诺

提供完整客观准确的实验报告。

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