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微生物ATP酶(ATPase)酶联免疫分析试剂盒说明书
本试剂盒用于测定微生物样本中ATP酶(ATPase)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人ATP酶(ATPase)水平。用纯化的人ATP酶(ATPase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入ATP酶(ATPase),再与HRP标记的ATP酶(ATPase)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的ATP酶(ATPase)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人ATP酶(ATPase)浓度。
微生物ATP酶(ATPase)酶联免疫分析试剂盒组成
130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶
2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(2000nmol/L)0.5ml×1瓶
3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶
4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份
5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张
6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。微生物ATP酶(ATPase)酶联免疫分析试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
1000nmol/L5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
500nmol/L4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液
250nmol/L3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液
125nmol/L2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液
62.5nmol/L1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液
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