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Ampligase® DNA Ligase W/Buffer epicentre A32250
产品简介:北京中北林格供应Ampligase® DNA Ligase W/Buffer epicentre A32250,中北林格是epicentre总代理,提供epicentre产品货号报价查询。其他包括lucigen总代理,cellscript总代理,Biosearch technologies总代理,epicentre总代理,illumina总代理,ICLLAB总代理,ImmunoReagents总代理。</p>
产品名称:Ampligase® DNA Ligase W/Buffer
货号:A32250
规格:250 U @ 5 U/μl
存储温度:-20℃
品牌:lucigen / epicentre</p>
供应商:中北林格</p>
产地:us</p>
发货地:北京</p
Ampligase® DNA Ligase W/Buffer epicentre A32250
应用说明:
- 连接扩增(连接酶链反应,LCR)1-7
- 重复扩增检测(RED)。7
- 多位点同时突变。8,9
- 其他连接为基础的检测方法。
Ampligase® Thermostable DNA Ligase催化NAD-依赖的双链DNA的3'-羟基化和5'-磷酸化末端的连接反应,对热稳定。该酶来源于嗜热细菌,与传统DNA连接酶相比,该酶具有更高的活性和稳定性。65°C时该酶半衰期为48小时,95°C时在1小时以上。
Ampligase DNA Ligase在500个以上热循环后(16个小时循环).10 这种高稳定性保证了极高的杂交严谨性和连接特异性。Ampligase DNA Ligase无平端DNA连接活性,无RNA或RNA:DNA杂交体连接活性。
优点说明
- 高热稳定性,保证可以使用更严谨的杂交温度。
- 高特异性和严谨性能够敏感检测SNPs.11
活力单位定义: 1个活力单位的Ampligase DNA Ligase指在1X Ampligase Reaction缓冲液中,45°C条件下1分钟能够催化1 µg的lambda DNA中的50% cos位点发生连接。
Note:一个单位的Ampligase DNA Ligase等价于至少15个别处定义的 "cohesive end units"或 "nick ligation units"。4
储存缓冲液: 50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT和0.1% Triton® X-100。
Ampligase 10X反应缓冲液: 200 mM Tris-HCl (pH 8.3), 250 mM KCl, 100 mM MgCl2, 5 mM NAD和0.1% Triton® X-100。
质量控制: Ampligase Thermostable DNA Ligase的活性通过在45°C条件下连接Sma I消化后产生的平端噬菌体DNA进行检测;电泳检测连接只发生在cos位点。Ampligase DNA Ligase不含DNA外切、内切核酸酶和RNA酶活性。
References
图例说明
Figure 2. Ligation Amplification using Ampligase? DNA Ligase. Oligonucleotides A, B, C, and D from Figure 1 (25 pmoles each) were incubated as in Figure 1 with 5 units of Ampligase DNA Ligase in 25 ?l of 1X Ampligase Reaction Buffer, with (+) or without (-) 0.25 pmole DNA template. The reactions were cycled 40 times for 1 minute at 94°C and 2 minutes at 65°C, then separated by electrophoresis and visualized with ethidium bromide. In the presence of template DNA, the target sequence is amplified by formation of the ligation products A+B and C+D.
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