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epicentre总代理 Tobacco Acid Pyrophosphatase T81050
点击次数:0发布时间:2019/9/27 10:41:30
更新日期:2019/9/27 10:41:30
所 在 地:中国大陆
产品型号:
优质供应
详细内容
Tobacco Acid Pyrophosphatase (TAP)
应用方面
- 制备模板用于5´ RACE。
- RNA的5´和3´末端作图。
- 连接寡核糖核酸至TAP处理的细胞RNA用于构建全长cDNA文库。
- 真核或原核转录本转录起始位点的作图。
- 放射性标记RNA用于测序和杂交探针。
Tobacco Acid Pyrophosphatase (TAP) 水解大部分真核生物mRNA帽子结构的三磷酸盐桥的磷酸酐键,产生帽子核苷和5´单磷酸化末端的RNA分子。形成的脱帽结构的5´单磷酸化末端可以通过T4 RNA Ligase连接至一个羟基末端,或者通过APex™ Heat-Labile Alkaline Phosphatase进行末端标记。同样,TAP也可以消化原核转录本的5´末端的三磷酸基团,产生5'单磷酸末端的RNA分子。
参数详情
活力单位定义: 标准反应条件下,37°C,30分钟,一个活力单位的TAP能够从m7GpppG释放1 nmol的无机磷。
储存缓冲液: 50%甘油含有10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT和0.01% Triton® X-100.
TAP 10X反应缓冲液: 0.5 M 错酸钠 (pH 6.0), 10 mM EDTA, 1% β-巯基乙醇和0.1% Triton® X-100。
质量控制: TAP通过RNA脱帽分析进行测试,不含DNA外切、内切核酸酶、RNA酶和5´磷酸酶活性。
参考
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- Fromont-Racine, M. et al. (1993) Nucleic Acids Res.21, 1683.
- Maruyama, K. and Sugano, S. (1994) Gene138, 171.
- Volloch, V. et al. (1994) Nucleic Acids Res.22, 2507.
- Kato, S. et al. (1994) Gene150, 243.
- Oh, J.H. et al. (2003) Exp. Mol. Med. 35, 586.
- Li, W. et al. (2003) J. Bioscience 28, 691.
- Bensing, B.A. et al. (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93, 7794.
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