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各种类型ELISA测定时一般需经过这些步骤：固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。
1.重复某一样品时，加样时间尽可能与次接近。
2.加样后在混匀器上充分混匀。
二、ELISA的基本原理有三条：
（1）抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；
（2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；
（3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。
由于ELISA法一方面是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上，因而，具有特异性。而另一方面又由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物，它可以催化底物分子发生反应，产生放大作用，正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA法是一种既敏感又特异的方法。
三、“人游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒”评价
1.灵敏度：①为试剂检出被检物质的量的能力；②为试剂对大量样品中阳性检出的能力。
2.特异性、精密度、准确度、简便性、安全性。
3.经济性：试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本，而市场价格比较合理；
4.试剂评价：需要有权威的确证方法和确证的样品进行检测。
四、产品优势
1.产品种类齐全、质量可靠、价格优惠、灵敏度高、效果稳定、易保存、操作简单；
2.发货及时；
3.免费提供ELISA试剂盒待测服务，上海拥有自己的实验和技术团队，公司为您提供全方位的售前、售中、售后技术支持，解决实验过程中遇到的问题；
4.免费提供产品*新报价、实验原理、产品用途及中英文说明书。
购买“人游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒”首先要注意有效期，尽量买刚出厂不久的。大家更多的了解试剂盒无非就是担心实验能否成功，试剂盒结果出来以后如何解释。只要是商品化试剂盒，都是比较稳定的，但一般检测抗原不如检测抗体准确度高。
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