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各种类型ELISA测定时一般需经过这些步骤：固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。
1.重复某一样品时，加样时间尽可能与次接近。
2.加样后在混匀器上充分混匀。
二、ELISA实验思路
在实验的可验证性中，现代科研的基本模式是假说驱动的，无法验证的假说难以进入科研活动过程，当然从大的历史条件下，如果只是因为技术上的困难而无法实现的假说另当别论。但是即使是这样，假说也必须具有理论上的可验证性。在科学发展的相对低级阶段，可验证性更为必要，尤其是作为普通科研人员，没有可验证性的思路往往难以产生发展的动力，更不要说有效的推广和应用。
在ELISA试剂盒实验思路中，具体正确性也需要更多研究来验证的。而ELISA实验的技巧、经验、步骤方法等可验证性也是非常重要的，我公司在日后的售后技术指导中也不会松懈，继续保持!技术指导服务的完善对产品负责、对客户负责。
三、注意事项
1.操作“兔子神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒”时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。
2.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
3.样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。
四、ELISA操作技巧
1.合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。
2.显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
3.加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
4.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
五、ELISA方法特点
1.基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达，表达产物包含更多的抗原决定簇，可提高试剂盒的灵敏度，提高检出率。
2.分子量大：合成肽采用化学方法制备，由于工艺的局限，合成数量有限，只能达到数百个氨基酸。而利用基因工程制备的抗原，分子量更大。
如果您购买了“兔子神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒”之后没时间做实验，我公司可以安排专业的技术人员为您进行免费代检测。
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