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ATP2c1/Ca++ ATPase成分,钙离子ATP酶通道蛋白抗体作用
点击次数：60发布时间：2015/7/3 15:55:12
更新日期：2015/7/3 15:55:12
所 在 地：美洲
产品型号：
品牌名称：Abcam
优质供应
详细内容
产品名称 钙离子ATP酶通道蛋白抗体
产品缩写 ATP2C1
蛋 白 名 Calcium-transporting ATPase type 2C member 1
别 称 HHD; BCPM; PMR1; SPCA1; hSPCA1; ATP2C1A
来 源 小鼠
特 异 性 抗人,猴
分 子 量 100kDa
克隆类型 单克隆抗体：IgG1；克隆号：4G12
应 用 WB免疫印迹；ELISA
成 分 Ascitic fluid containing 0.03% sodium azide.
免 疫 原 Purified recombinant fragment of ATP2C1 expressed in E. Coli.
保存条件 连续使用时4°C存储，保质期六个月；长期存储时建议分装为10ul以上小包装-20°C存储，并避免反复冻融，保质期一年。
背景资料 ATP2C1, also known as PMR1, it belongs to the family of P-type cation transport ATPases. This magnesium-dependent enzyme catalyzes the hydrolysis of ATP coupled with the transport of the calcium. The human homologue, ATP2C1 (also
designated SPLA in rat), also regulates the transport of calcium in the Golgi
complex ａnd is related to other P-type ATPases family members, such as the
sarco(endo)plasmic calcium ATPase (SERCA) ａnd the plasma membrane calcium
ATPase (PCMA). ATP2C1 is a transmembrane protein that exists as two
splice variants, which vary by 20 amino acids. Defects in ATP2C1 cause Hailey-Hailey disease, which is an autosomal dominant disorder that is characterized by blisters ａnd erosions of the skin. These findings provide further evidence that PMR1 plays a key role in maintaining the integrity of the epidermis by controlling intracellular calcium signaling.
钙离子ATP酶通道蛋白抗体的鉴定
对制备的McAb进行系统的鉴定是十分必要的，应做下述几个方面的鉴定：
1．抗体特异性的鉴定
除用免疫原（抗原）进行抗体的检测外，还应该用与其抗原成分相关的其它抗原进行交叉试验，方法可用ELISA、IFA法。例如：①制备抗黑色素瘤细胞的McAb，除用黑色素瘤细胞反应外，还应该用其它脏器的肿瘤细胞和正常细胞进行交叉反应，以便挑选肿瘤特异性或肿瘤相关抗原的单克隆抗体。②制备抗重组的细胞因子的单克隆抗体，应首先考虑是否与表达菌株的蛋白有交叉反应，其次是与其它细胞因子间有无交叉。
2．McAb的Ig类与亚类的鉴定
一般在用酶标或荧光素标记的第二抗体进行筛选时已经基本上确定了抗体的Ig类型。如果用的是酶标或荧光素标记的兔抗鼠IgG或IgM，则检测出来的抗体一般是IgG类或IgM类。至于亚类则需要用标准抗亚类血清系统作双扩或夹心ELISA来确定。在作双扩试验时，如加入适量的PEG（3%），更有利于沉淀线的形成。
3．McAb中和活性的鉴定
用动物或细胞的保护实验来确定McAb的生物学活性。例如，如果确定抗病毒McAb的中和活性，则可用抗体和病毒同时接种于易感的动物或敏感的细胞，来观察动物或细胞是否得到抗体的保护。
4．McAb识别抗原表位的鉴定
用竞争结合试验，测相加指数的方法，测定McAb所识别抗原位点，来确定McAb的识别的表位是否相同。
5．McAb亲合力的鉴定
用ELISA或RIA竞争结合试验来确定McAb与相应抗原结合的亲合力。
钙离子ATP酶通道蛋白抗体原理对制备的McAb进行系统的鉴定是十分必要的，应做下述几个方面的鉴定：
1．抗体特异性的鉴定
除用免疫原（抗原）进行抗体的检测外，还应该用与其抗原成分相关的其它抗原进行交叉试验，方法可用ELISA、IFA法。例如：①制备抗黑色素瘤细胞的McAb，除用黑色素瘤细胞反应外，还应该用其它脏器的肿瘤细胞和正常细胞进行交叉反应，以便挑选肿瘤特异性或肿瘤相关抗原的单克隆抗体。②制备抗重组的细胞因子的单克隆抗体，应首先考虑是否与表达菌株的蛋白有交叉反应，其次是与其它细胞因子间有无交叉。
2．McAb的Ig类与亚类的鉴定
一般在用酶标或荧光素标记的第二抗体进行筛选时已经基本上确定了抗体的Ig类型。如果用的是酶标或荧光素标记的兔抗鼠IgG或IgM，则检测出来的抗体一般是IgG类或IgM类。至于亚类则需要用标准抗亚类血清系统作双扩或夹心ELISA来确定。在作双扩试验时，如加入适量的PEG（3%），更有利于沉淀线的形成。
3．McAb中和活性的鉴定
用动物或细胞的保护实验来确定McAb的生物学活性。例如，如果确定抗病毒McAb的中和活性，则可用抗体和病毒同时接种于易感的动物或敏感的细胞，来观察动物或细胞是否得到抗体的保护。
4．McAb识别抗原表位的鉴定
用竞争结合试验，测相加指数的方法，测定McAb所识别抗原位点，来确定McAb的识别的表位是否相同。
5．McAb亲合力的鉴定
用ELISA或RIA竞争结合试验来确定McAb与相应抗原结合的亲合力。
(1)特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。
(2)激活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
(7)通过与细胞Fc受体结合发挥多种生物效应
①调理作用
IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、FcμR结合，增强其吞噬能力，通常将抗体促进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理作用 (opsonization)。
②发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。
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