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新消息:兔金属硫蛋白1E (MT1E) ELISA 试剂盒@2023已更新推荐
兔金属硫蛋白1E (MT1E) ELISA 试剂盒
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联吸附试验(ELISA)。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
实验所需自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
试剂盒组成
名称 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12 孔×8 条 | 12 孔×4 条 | 无 |
标准品 | 0.5mL | 0.5mL | 按说明书进行稀释 |
标准品稀释液 | 6mL | 3mL | 按说明书进行稀释 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 按说明书进行稀释 |
检测抗体-HRP | 6mL | 3mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 20mL | 20mL | 按说明书进行稀释 |
底物 A | 6mL | 3mL | 无 |
底物 B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2 张 | 2 张 | 无 |
说明书 | 1 份 | 1 份 | 无 |
自封袋 | 1 个 | 1 个 | 无 |
操作步骤
兔金属硫蛋白1E (MT1E) ELISA 试剂盒
结果分析
1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。
2. 推荐使用业的曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3. 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
注意事项
1. 试剂盒的质量:选择正规厂家生产的试剂盒,确保试剂盒的质量和稳定性。
2. 严格控制实验条件:实验过程中要严格控制温度、pH值、离子强度等条件,以实验结果的准确性。
3. 避免交叉污染:实验过程中要避免交叉污染,确保每个步骤使用的试剂和材料都是清洁无污染的。
4. 标准化操作:实验操作要标准化,严格按照试剂盒说明书进行操作,避免人为误差对实验结果的影响。
5. 定期校准:定期对实验仪器进行校准,确保仪器的准确性和稳定性。
6. 保存好实验数据:实验过程中要保存好实验数据,以便后续分析和处理。
兔胰淀粉酶α2(AMY2) ELISA 试剂盒 |
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原创作者:上海笃玛生物科技有限公司