使用说明书

试剂盒采用双一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被白蛋白（ALB）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

布ELISA：（C－ELISA）　C－ELISA（Cloth-ELISA）是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型检测技术。该是以疏水性聚脂布（Hydrophobic Polyester Cloth）即涤纶布为固相载体，这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大，可为反应提供较大的表面积，反应的性，且容易洗涤，不需特殊仪器等优点。其基本原理与Dot-ELISA类似，只是载体不同。以对布氏杆菌抗原的检测为例，C－ELISA的主要程序为：⑴ 把抗布氏杆菌的包被（吸附）在聚脂布上，并经洗涤及封闭；⑵ 加被检样品并于室温下感作30分钟，然后洗5次；⑶ 加酶标记的抗布氏杆菌，于室温下感作30分钟，然后洗涤5次；⑷ 加入底物液显色；⑸ 测定OD值。

样品收集、处理及保存

2.  ：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

4.  组织匀浆：将组织加入适量盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

1. 酶标仪（450nm）

3. 37℃恒温箱

操作步骤：1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。2. 设置品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；品孔各加不同浓度的品 50μL；3. 待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；4. 随后品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测 50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。5. 弃去，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗 板 5 次（也可用洗板机洗板）。6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。7. 所有孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

绵羊血小板膜糖蛋白IIb/IIIa(GPIIb/IIIa)ELISA试剂盒

操作注意事项

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

试剂的

洗板

2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

5.  弃去，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

 绘制曲线：在Excel工作表中，以品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

免责声明：试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或生物体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担， 本公司概不负责。严格按照说明书操作，不同批号不可交换使用，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

试剂盒性能

2.  灵敏度检测浓度小于1.0 mg/mL。

4.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

6.  有效期：6个月

免责声明

2.   严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

原创作者：上海笃玛生物科技有限公司