使用说明书

试剂盒采用双一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被白蛋白（ALB）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

自从Engvall和Perlman(1971）报道建立酶联吸附试验（Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA）以来，由于ELISA具有快速、、简便、易于化等优点，使其迅速的发展和广泛应用。尽管早期的ELISA由于特不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐，但随着的不断改进、材料的不断更新，尤其是采用基因工程制备包被抗原，采用针对某一抗原表位的单克隆进行ELISA试验，都大大了ELISA的特，加之电脑化程度的ELISA检测仪的使用，使ELISA更为简便实用和化，从而使其成为广泛应用的检测。如ELISA已被广泛应用于多种和等的诊断。在动物检疫方面，ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的。

样品收集、处理及保存

2.  ：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

4.  组织匀浆：将组织加入适量盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

1. 酶标仪（450nm）

3. 37℃恒温箱

间接ELISA：本法主要用于检测。（DVH）的ELISA为例，间接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液；② DVH包被抗原、酶标抗、阴性及阳性DVH参考；待检鸭；③ ELISA检测仪、加样器、聚微量板。⑵ 步骤① 加抗原包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干② 加待检 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干③ 加酶标 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干④ 加底物液　→ 37℃ 30分钟，加终止液⑤ 用ELISA检测仪测定OD值，并计算出P/N比值。⑶ 结果判定　已知阳性与已知阴性的比值（P/N）≥2.1，而且已知阳性的OD值≥0.4；在上述条件成立的情况下，如果待检与已知阴性的比值（P/N）≥2.1，而且待检的OD值≥0.4，则判为阳性，否则判为阴性。

豚鼠垂体腺苷酸环化酶肽38(PACAP-38)ELISA试剂盒

操作注意事项

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

试剂的

洗板

2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

5.  弃去，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

 绘制曲线：在Excel工作表中，以品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

上海笃玛生物科技有限公司ELISA试剂盒采用原装进口，一步孵育，一步洗板，操作时间仅需90分钟，就能准确的实验结果。刚开起的酶联板孔会含有少许水样，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响，您尽可放心使用。本司研发各种种属ELISA试剂盒：1、细胞因子检剂盒，如白介素、选择素、集落因子，坏死因子，素，转化生长因子，趋化因子，细胞因子受体，粘附分子，生长因子，凋亡因子等等；2、肝纤维化检测ELISA试剂盒，如纤维连接蛋白，质酸，胶原，基质金属蛋白酶因子，基质金属蛋白酶，层粘蛋白等等；3、检测ELISA试剂盒，如肌钙蛋白，肌红蛋白，C-反应蛋白等等；4、内检测ELISA试剂盒，如甲状腺,,性,,,,生长抑素,内皮素,皮质醇,骨钙素,催乳素,皮质,促素,，雌三醇，5-色胺，17-等等；5、自身检测ELISA试剂盒，如甲状腺,盐水可提取核抗原(ENA),抗核,DNA,抗心磷脂,类因子,循环复合物,抗胰岛细胞,胰蛋白酶原,Sm,大疱性类疱,蛋白酶,短膜虫法,肝-,肝－－胃,肌内膜,角蛋白,抗核,抗核糖体蛋白,抗聚角蛋白微丝蛋白,抗链O,抗,抗肌,抗线粒体,抗心肌,抗组蛋白,粒细胞弹性蛋白酶,皮肤,小球基底膜,小球基底膜,髓过氧化物酶,条纹肌,网硬蛋白,胃壁细胞,胃蛋白酶,,性渗透性增强因子等等；6、标志物检测ELISA试剂盒，如标志物，组织多肽抗原，相关，细胞角蛋白片段，胃肠癌，铁蛋白，糖链抗原，神经特稀醇化酶，上皮膜抗原，，人抗小鼠，，甲胎蛋白，，，，大隐血检测，癌胚抗原，β-2微球蛋白等等；7、优生优育检测ELISA试剂盒，如早,新生儿TSH,检测,抗心磷脂,抗带,抗带,抗,抗,巨细胞,弓形体,风疹,分娩,单核白细胞增多症,单纯疱疹,促素,促,便隐血,HCG等等；8、传染病检测ELISA试剂盒，如幽门螺杆菌,乙脑,,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,,,腺,微小B19,天疱,水-带状疱疹,生支原体,,沙眼,腮腺炎,人型支原体,,轮,,莱姆病,柯萨奇,抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,,甲肝,,急性炎尿胰蛋白酶,,呼吸道合胞,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,,,艾柯,EB,A族链球菌等等；9、特种蛋白检测ELISA试剂盒，如球蛋白,抗链O-aso,类因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等.

试剂盒性能

2.  灵敏度检测浓度小于1.0 mg/mL。

4.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

6.  有效期：6个月

免责声明

2.   严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

原创作者：上海笃玛生物科技有限公司