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豚鼠S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)ELISA试剂盒
使用说明书
试剂盒采用双一步夹心法酶联吸附试验(ELISA)。往预先包被白蛋白(ALB)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
本试剂盒采用双夹心法酶联吸附试验(ELISA)。往预先包被捕获的包被微孔中,依次加入标本、品、HRP标记的检测,经过温育并洗涤。
样品收集、处理及保存
2. :EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
1. 酶标仪(450nm)
3. 37℃恒温箱
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
豚鼠S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)ELISA试剂盒
操作注意事项
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
试剂的
洗板
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
5. 弃去,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
绘制曲线:在Excel工作表中,以品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
自从Engvall和Perlman(1971)报道建立酶联吸附试验(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以来,由于ELISA具有快速、、简便、易于化等优点,使其迅速的发展和广泛应用。尽管早期的ELISA由于特不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐,但随着的不断改进、材料的不断更新,尤其是采用基因工程制备包被抗原,采用针对某一抗原表位的单克隆进行ELISA试验,都大大了ELISA的特,加之电脑化程度的ELISA检测仪的使用,使ELISA更为简便实用和化,从而使其成为广泛应用的检测。如ELISA已被广泛应用于多种和等的诊断。在动物检疫方面,ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的。
试剂盒性能
2. 灵敏度检测浓度小于1.0 mg/mL。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
6. 有效期:6个月
免责声明
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
原创作者:上海笃玛生物科技有限公司