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免疫沉淀去除重链轻链干扰如何选择荧光二抗
免疫沉淀在用有限资源的一抗情况下,使用的相同的一抗或同种属来源的一抗,同时是用到了常规的Anti-IgG(H+L)酶标二抗,很多的童鞋就会遇到WB实验中IP抗体变性后产生的重链(55kDa)和轻链(25kDa)都能够识别, 而此非特异的信号往往会部分甚至完全掩盖目的蛋白的信号,影响实验结果。
那么该如何避免轻链或者重链的干扰呢?艾美捷有妙招:
- 如果您的目标蛋白分子量小于30Kda,为了避免抗体轻链的干扰,艾美捷推荐您使用重链特异性的二抗
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《IPkine重链特异性抗体结果图》
- 如果您的目标蛋白分子量大于30Kda,为了避免抗体重链的干扰,艾美捷推荐您使用轻链特异性的二抗
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