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篇文献-CUT&RUN优点全现

点击次数:0发布时间:2021/10/15 17:26:35

篇文献-CUT&RUN优点全现

更新日期:2021/10/15 17:26:35

所 在 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:EpiNext CUT&RUN Fast Kit,从低输入提供无超声破碎,以可靠地识别真正的目标蛋白质富集区域并实现高分辨率定位。可满足快速富集蛋白质结合的DNA并绘制全基因组蛋白质/DNA相互作用的图谱的需求。

相关标签:CUT&RUN CUT&RUN Fast Kit 

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详细内容

 作为ChIP的高效替代方案你可能不知道CUT&RUN有多业,那小编就拿下面这篇文献来分析下吧~

 

文献:Targeted in situ genome-wide profiling with high efficiency for low cell numbers

 

51.fw.png

 

随着技术的发展,ChIP-seq的改进可以实现TFs 6-8碱基对分辨率的映射,但实验结果还是存在很多问题,比如说ChIP的高背景限制了灵敏度,需要的细胞比较多以及交联和增溶产生的假象。而CUT&RUN相比于传统ChIP在细胞量和信噪比等方面的优势。

 

1)在整个实验过程中,pMNase的量对片段化的结果至关重要

 

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fig1.两批样品500μl体积中,600,000K562细胞,加入不同浓度的pA-MN,片段化之后,采用TapeStation 通过分析荧光强度来分析pA-MNH3K27me3基因组片段化的影响。

 

2)CUT&RUN技术用于少量细胞,信噪比很好

 

研究者检测了100-6000个K562细胞的H3K27me3的基因组分布,发现在低至100细胞时,CUT&RUN仍可以很好地检测出H3K27me3的峰,而且在异染色质区也样可以看到峰。

 

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fig2.CUT&RUN可以检测低至100细胞的H3K27me3基因组分布(aENCODE数据库中的K562细胞的H3K27me3 ChIP-seq结果,及6000-100K562细胞的H3K27me3 CUT&RUN结果。(bCUT&RUN结果的散点图,以50bp为个bin,相对于阴性对照IgG6000细胞与100细胞有明显更强的相关性。(c)热图显示6000-100细胞的CUT&RUN结果有很好的相关性。

 

3)CUR&RUN技术检测的信噪比要比传统ChIP-seq高很多

 

研究者检测了转录因子CTCF的基因组结合位点,发现CUR&RUN技术检测比ENCODECTCF ChIP-seq的信噪比要高很多,而且只需1.25万细胞就能得到很高质量的结果。尽管用1000细胞则会损失些峰。

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fig3.用CUT&RUN检测CTCF的结合位点,比ENCODE中的CTCF ChIP-seq信噪比高很多。

 

本文图2、图3分析源自CST公司。

艾美捷作为表观遗传域业的解决方案供应商,推荐EpiGentek的EpiNext CUT&RUN Fast Kit,cat#:P-2028,该试剂盒从低输入提供无超声破碎,以可靠地识别真正的目标蛋白质富集区域并实现高分辨率定位。可满足您快速富集蛋白质结合的DNA并绘制全基因组蛋白质/DNA相互作用的图谱的需求。

 

来源:https://www.amyjet.com/featured/cutrun-2.shtml

 

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