Elevated cathepsin enzyme activity in serum or the extracellular matrix can signify a number of pathological conditions. ICT’s Magic Red assay kits are used by researchers seeking to quantitate ａnd monitor cathepsin activity in cultured cells ａnd tissues. This assay kit detects cathepsin-B activity. To use Magic Red, add the substrate directly to the cell culture media, incubate, ａnd analyze. Because it is cell permeant, it easily penetrates the cell membrane ａnd the membranes of the internal cellular organelles – no lysis or permeabilization steps are required. If cathepsin enzymes are active, the Magic Red substrate is cleaved ａnd the cresyl violet fluorophore will become fluorescent upon excitation. As enzyme activity progresses ａnd more Magic Red substrate is cleaved, the signal will intensify, allowing researchers to watch the color develop over time. Samples can be analyzed by fluorescence microscopy or with a fluorescence plate reader. Hoechst 33342 ａnd Acridine Orange are included in the kit to detect nuclear morphology ａnd lysosomal organelle structure, respectively.
血清或细胞外基质中组织蛋白酶活性升高可表示多种病理状况。艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒被研究人员用来定量和监测培养细胞和组织中的组织蛋白酶活性。
该试剂盒检测组织蛋白酶B活性。要使用魔力红，将基质直接添加到细胞培养基中，孵育并分析。因为它是细胞渗透性的，它很容易穿透细胞膜和内部细胞器的膜——不需要裂解或渗透步骤。如果组织蛋白酶是活性的，魔红底物被裂解，甲酰紫荧光团将在激发时变为荧光。随着酶活性的进展和更多魔红底物的裂解，信号将增强，使研究人员能够观察颜色随时间的变化。样品可通过荧光显微镜或荧光板读取器进行分析。试剂盒中包括Hoechst 33342和吖啶橙，分别用于检测核形态和溶酶体细胞器结构。
艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒：
试剂名称MR-RR2
靶向组织蛋白酶B
激发/发射592 nm/628 nm
荧光板读数器、荧光显微镜的分析方法
样品类型细胞培养
储存2-8°C
艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒注意事项：
准备样品和对照品
通过加入DMSO重新配制魔力红。
通过加入diH2O稀释魔力红1:10。
向每个样品中加入20µL魔红（约500µL培养细胞等分试样）。
避光培养。
观察颜色在15分钟内开始显现。
如果需要，用其他污渍标记，如Hoechst、DAPI或抗体。
如果需要，修复单元格。
用荧光显微镜或荧光板读取器进行分析。魔力红的佳激发波长为592nm，发射波长为628nm。
如果使用贴壁细胞，请参阅手册了解其他方案。
来源：https://www.amyjet.com/products/ICT-937.shtml
