高回收率(75%-105%)，多种样品的低成本提取方法；高重复性；检测过程只需要不到1.5小时；五合一处理方法更省时、经济、环保。

产品概述

迪美唑检测试剂盒酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，含有迪美唑检测试剂盒(SEM)的抗体已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同SEM-HRP共同被添加到板孔中。如果样品中含有SEM，会竞争SEM抗体，抑制SEM-HRP与板上包被的抗体结合。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中SEM的浓度成反比。

 试剂盒组成

已包被的酶标板（可拆式）                                            12×8 孔

标准液（0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4ppb）                              6×2.0mL

回收用10ppb(Spiking)——可选                                        1×0.8ml

HRP酶标抗原(HRP-Conjugated)                                         1×6mL

10×样品提取液(Sample Extraction Buffer)                             1×25mL

20×浓缩洗液(Wash Solution)                                          1×30mL

终止液(Stop Buffer)                                                  1×20mL

TMB底物(TMB Substrate)                                               1×10mL

50mM 2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)                               1×1.8mL

本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存，有效期为一年。如果超过3个月不使用试剂盒，

请将SEM-HRP酶标抗原放置-20℃或者冰冻保存。

检测试剂盒以外需要提供的设备或材料

1)      酶标仪(450 nm)

2)      恒温培养箱

3)      匀浆器

4)      蒸干器

5)      漩涡振荡器

6)      移液枪(50，100mL，1mL各一支)

7)      多道移液器（50-300mL）

8)      乙酸乙酯

9)      0.1M K₂HPO₄

10) 正己烷

注意事项

实验前请阅读以下文字，以保证获得*佳实验效果。

1)      标准品中含有迪美唑检测试剂盒，请小心使用。

2)      不要使用过期的试剂盒。

3)      不同批次的试剂盒不要混用，抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。

4)      尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。

5)      水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。

6)      加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。

7)      孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。

8)      从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。

9)      将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。

样品的准备【迪美唑检测试剂盒】

确保样品的正确保存，一般来说，样品在2-4只能保存1-2天，如果要保存更长时间，就要保存在-20冷冻保存，在用之前需要将冷冻的样品在室温下或冰箱内解冻。

1×样品提取液

按1：9的比例配制样品提取浓缩液和双蒸馏水。

1）饲料（用于检测添加到饲料中的鱼粉、虾粉或动物组织的SEM）

（1）    取0.5g匀质样品，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCl和20 µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，涡旋振荡1min；

（2）    50°C恒温培养3小时，在培养期间，每1h振荡5秒；

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，转速涡旋震荡1min；

（4）    室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL乙酸乙酯上清液（含0.25g初始样品）到另一试管（避免触及下层水相！如果

移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60-70 °C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品提取液，转速涡旋振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：4.0

2）鱼/虾/肉（牛肉/鸡肉/猪肉）：可用于五合一前处理方法

（1）    称取1g匀浆样品加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCl和20µL50 mM 2-硝基苯甲醛，涡旋震荡30秒；

（2）    50°C恒温培养3h，培养期间，每1h振荡5秒；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，涡旋震荡振荡30s；

（4）    室温下（20-25℃）4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品)到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），如果出现乳化现象，上清液不足3mL，请85℃水浴3分钟。在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；（注：肝脏组织富含脂肪、色素等，为防止乳化现象，建议选用4mL正己烷溶解，涡旋震荡30秒后，再进行下一步操作）

（7）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡1分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

注意：为了避免过高的背景值，建议用空白样品做平行，从取3ml乙酸乙酯上清旋转蒸发开始。

稀释倍数：2.0

3）鸡蛋【迪美唑检测试剂盒】

（1）    称取1g鸡蛋样品加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡30秒；

（2）    50°C恒温培养3小时，在培养期间，每1h振荡5秒；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，涡旋震荡振荡30s；

（4）    室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60-70℃减压蒸馏或60-70℃氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品抽提工作液体，剧烈振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

注意：为了避免过高的背景值，建议用空白样品做平行，从取3ml乙酸乙酯上清旋转蒸发开始。

4）蜂蜜

（1）    称取1g蜂蜜加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（2）    50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；

（4）    室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

5）牛奶

（1）    对于含脂牛奶，取待测牛奶样品3ml室温4000g，5min。除去上层脂肪层。（对于脱脂奶粉，次步略）

（2）    取1ml样品，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（3）    50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

     稀释倍数：2.0

6）血清【迪美唑检测试剂盒】

（1）        称取1g血清加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（2）        50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）        加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；

（4）        室温下4000g离心10分钟；

（5）        取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移

取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）        用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）        加入1mL1×样品提取液，剧烈

（8）        振荡2分钟；

（9）        室温下4000g离心10分钟；

（10）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

     稀释倍数：2.0

7）尿样

（1）    取3ml尿样，4000g离心5min。

（2）    离心后称取1ml，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（3）    50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；

（5）    室温下4000g离心10分钟；

（6）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（7）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（8）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；

（9）    室温下4000g离心10分钟；

（10）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

检测步骤

试剂的准备

注意：试剂在使用之前要在室温下解冻1-2小时，确定在使用前阅读过注意事项。准备适量的检测用试剂，所有的试剂摇匀后使用。准备足够所有小管所需的用量，不能将试剂倒回原来的瓶子中，处理试剂时建议用废弃的瓶子以降低污染的风险。

1x洗液的制备

1体积的20x洗液同19体积的蒸馏水混合

检测

\以下为计算份量的表格，用户可根据自己的需要来确定需要配置多少试剂。

（1）    加入100mL的标准品于所设定的孔中；

（2）    加入100mL的样品于所设定的孔中

（3）    在每孔中加入50mL 1×SEM-HRP，轻敲微孔板边缘混匀1分钟；

（4）    室温（22.5±2.5）°C避光孵育30分钟；

（5）    洗板3次，每次应该加入250mL 1×洗液，*后一次使板尽量甩干并在吸水纸上吸干；

（6）    每孔加入100mL的TMB底物；

（7）    在室温（22.5±2.5）°C避光孵育20分钟后，每孔加入100mL的终止液终止反应;

（8）    在450nm或450/650nm下读OD值 (读数前，用吸水纸将板底部的指痕和水分擦去，避免影响读数)。

10．结果计算【迪美唑检测试剂盒】

（1）    分别计算标准、质控和样品的平均吸光度值和相对吸光度值。

相对吸光度值 (%) = (标准或样品吸光度值/零标准吸光度值) ´ 100

（2）    以相对吸光度值为纵坐标，标准浓度为横坐标建立标准曲线。

（3）    从标准曲线上读取质控和样品的浓度值。

（4）    样品检测下限计算方法如下：

样品检测下限 = (0.025ng/g) ´ (稀释倍数)

样品定量下限 = (0.1ng/g) ´ (稀释倍数)

例如，肉类样品的稀释倍数是2.0,那么肉类样品的检测下限是0.05ppb,定量检测下限是0.2ppb。

9238862  #Premium Cover Agreement 9604, 2PM, 1yr The Premium Cover Agreement 9604, 2 PM provides full service coverage for the BioRobot 9604. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes two annual preventive maintenance visits, with costs for labor ａnd parts covered. With a Full Agreement, there is a priority response time of 24 hours (1 working day).     CNY                             

9241208  QIAsymphony SP, Premium Agreement   "Repair service delivery: onsite

Service response time (repair): 24 hours/1 business day

Periodic inspection/maintenance: yes, 1/agreement year

Inspection/maintenance delivery: onsite

Cost coverage for Repair Parts : yes, full coverage

Cost coverage for labor: yes, full coverage

Cost coverage for travel: yes, full coverage

Replacement system (Loaner) provision: not applicable

Transportation cost coverage: not applicable

- QIAsense: QIAsymphony should to be connected to QIAsense for faster download of log files ａnd remote diagostic support." CNY                             

9241200  QIAxcel, Basic Agreement, no PM  "Repair service delivery send to Regional Repair Center

Service response time (repair) 7-10 days turnaround time

Periodic inspection/maintenance: 0

Cost coverage for Repair Parts : yes, full coverage

Cost coverage for labor: yes, full coverage

Cost coverage for travel: yes, full coverage

Replacement system (Loaner) provision: not applicable

Transportation cost coverage: not applicable"        CNY                             

9019468  PLATE GLASS LONG SET GS                CNY                             

9233375  Prssure retaining valve for Washer Mod.                  CNY                             

9237348  AdapterPlate, W-Drive, BR8 RD v2.0                CNY                             

9237329  Upgrade, BR & 3 ext. devices w. sched.  Upgrade BioRobot with three approved integration devices using scheduling software  CNY                              【迪美唑检测试剂盒】

9237168  Bottle Sheath Supply                 CNY                             

9233004  Fan 24V, for BR3000 with VariTerm                   CNY                             

9237151  Power Supply            CNY                             

9237123  Upgrade App., QIAquick 96 PCR      On-site application Upgrade for standard QIAGEN QIAquick 96 including kit CNY                             

9237106  Protocol Dev./Opt., on-site (2-days)         The QIAGEN BioRobot Systems Protocol Development/Optimization On-Site Visit includes all travel ａnd labor charges for a site visit up to 2 days by a QIAGEN Instrumentation Service Specialist to write and/or opimize protocols for the BioRobot System. Parts, consumable chemistries, ａnd accessories not included. Custom protocols are the sole responsibility of the customer ａnd neither warrantied nor guaranteed.          CNY                             

9237097  Training, BR QIAGEN Advanced       A minimum of 4 people are required to attend. The QIAGEN BioRobot Systems Advanced Training includes three days of  training at our training facility to introduce users to advanced software topics for the  QIAGEN BioRobot Systems.  Designed for users with a basic understanding of the use ａnd programming of QIAGEN BioRobot systems who want to write complex protocols for their instrument, the advanced training starts with a brief review of basic concepts such as teaching slots ａnd racks before exploring the higher-level programming features of the QIAsoft Operating System.  Topics include the structure ａnd use of functions, using variable for programming flexibility, IF/ELSE/END boolean logic commands, ａnd parameterized pipetting using tables.  Users will write, test ａnd run protocols they have developed to demonstrate ａnd reinforce training success.       CNY                             

9236422  Power supply, replacement kit, TWI                  CNY                             

9232968  Print YZ96-Adapter-Board Plato-7            CNY                             

9236363  Reservoir XYP            CNY                             

9236353  Tubing Sample Needle to 3-Way Valve              CNY                             

9236329  2-Way Valve (Sheath or vent)           CNY                             

9236160  Potentionmeter, rotary, kit, RapidPlate           CNY                             

9236154  Online Fill Pump RP           CNY                             

9236126  QIAGEN Multiwell-Plate Holder , silver   Holder for accommodating multiwell plates on the Microplate station of the BioRobot MDx worktable         CNY                             

9236120  Runner, Drawer, BR8 RD                   CNY                             

9235790  Ramp, Locking, Drawer, BR8 RD              CNY                              【迪美唑检测试剂盒】

9230745  Z-Lead screw for Plato 7           CNY                             

9235690  Cable X-Main, RCS1           CNY                             

9235572  Shaker Tool, RCS1              CNY                             

9230314  Cable, RS232, syringe pump, 225mm                CNY                             

9230283  Cable, Interface, X-main to Washer                   CNY                             

5000-1302        Capacitor 2UF, SKR1                  CNY                             

5000-1284        DML 2000 - Power Cord, 220V D Type (GB)              CNY                             

5000-1254        Power Supply PCB, DML2                  CNY                             

5000-1250        CPU DML 2000 ASSRY Kit, DML2              CNY                             

6000-3401        RCS Upgrade Package               CNY                             

QY-x1525 小鼠肾癌细胞RenCa                                                   

QY-x1526 小鼠胰岛素瘤β细胞（NOD/Lt转基因小鼠，SV40巨T抗原）NIT-1                                                    

QY-x1527 早代小鼠胚胎成纤维细胞MEF                                                  

QY-x1528 中国仓鼠肺细胞V79                                                   

QY-x1529 兔的肝细胞VX2                                                   

QY-x1530 鸡胚原代肝细胞CEL                                                    

QY-x1531 129小鼠ES细胞D3                                                     

QY-x1532 129小鼠ES细胞E14                                                   

QY-x1533 BALB/c小鼠ES细胞B/c-ES                                                 

QY-x1534 猴的骨髓间充质干细胞MSCS                                                     

QY-x1535 SD大鼠骨髓间充质干细胞SDBMSC                                                   

QY-x1536 鼠胸腺激酶缺陷细胞株L-MTK                                                   

QY-x1537 鼠胚成纤维细胞系STO                                               

QY-x1538 鼠乳腺癌细胞系MA-782                                                      【迪美唑检测试剂盒】

QY-x1539 鼠成纤维细胞系GR                                                     

QY-x1540 杂交瘤细胞枝原体阳性B6YH4                                                   

QY-x1541 鼠细胞系B82                                               

QY-x1542 兔肾细胞系RK-13                                                

QY-x1543 猴肾细胞系MA-104                                                     

QY-x1544 VERO衍生株SVP                                                 

QY-x1545 猪肾细胞系PK-15                                                

QY-x1546 猪肾细胞系IBRS-2                                              

QY-x1547 草鱼肾细胞系GIK                                               

QY-x1548 昆虫细胞系Sf-21                                                 

QY-x1549 昆虫细胞系SF-9                                                   

QY-x1550 草鱼肝脏细胞L8824                                                    

QY-x1551 草鱼肾脏细胞CIK                                                

QY-x1552 团头鲂尾鳍细胞WCF                                                  

QY-x1553 白鲢尾鳍细胞SCF                                                

QY-x1554 散鳞镜鲤尾鳍细胞                                                        【迪美唑检测试剂盒】

QY-x1555 鲤鱼尾鳍细胞                                                       

QY-x1556 转化的豚鼠胎体细胞104C1                                               

QY-x1557 中国仓鼠肾细胞(二氢叶酸还原酶缺陷型)CHO/dhFr-