高回收率(75%-105%)，多种样品的低成本提取方法；高重复性；检测过程只需要不到1.5小时；五合一处理方法更省时、经济、环保。

产品概述

伏马毒素检测试剂盒酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，含有伏马毒素检测试剂盒(SEM)的抗体已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同SEM-HRP共同被添加到板孔中。如果样品中含有SEM，会竞争SEM抗体，抑制SEM-HRP与板上包被的抗体结合。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中SEM的浓度成反比。

 试剂盒组成

已包被的酶标板（可拆式）                                            12×8 孔

标准液（0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4ppb）                              6×2.0mL

回收用10ppb(Spiking)——可选                                        1×0.8ml

HRP酶标抗原(HRP-Conjugated)                                         1×6mL

10×样品提取液(Sample Extraction Buffer)                             1×25mL

20×浓缩洗液(Wash Solution)                                          1×30mL

终止液(Stop Buffer)                                                  1×20mL

TMB底物(TMB Substrate)                                               1×10mL

50mM 2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)                               1×1.8mL

本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存，有效期为一年。如果超过3个月不使用试剂盒，

请将SEM-HRP酶标抗原放置-20℃或者冰冻保存。

检测试剂盒以外需要提供的设备或材料

1)      酶标仪(450 nm)

2)      恒温培养箱

3)      匀浆器

4)      蒸干器

5)      漩涡振荡器

6)      移液枪(50，100mL，1mL各一支)

7)      多道移液器（50-300mL）

8)      乙酸乙酯

9)      0.1M K₂HPO₄

10) 正己烷

注意事项

实验前请阅读以下文字，以保证获得*佳实验效果。

1)      标准品中含有伏马毒素检测试剂盒，请小心使用。

2)      不要使用过期的试剂盒。

3)      不同批次的试剂盒不要混用，抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。

4)      尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。

5)      水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。

6)      加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。

7)      孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。

8)      从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。

9)      将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。

样品的准备【伏马毒素检测试剂盒】

确保样品的正确保存，一般来说，样品在2-4只能保存1-2天，如果要保存更长时间，就要保存在-20冷冻保存，在用之前需要将冷冻的样品在室温下或冰箱内解冻。

1×样品提取液

按1：9的比例配制样品提取浓缩液和双蒸馏水。

1）饲料（用于检测添加到饲料中的鱼粉、虾粉或动物组织的SEM）

（1）    取0.5g匀质样品，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCl和20 µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，涡旋振荡1min；

（2）    50°C恒温培养3小时，在培养期间，每1h振荡5秒；

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，转速涡旋震荡1min；

（4）    室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL乙酸乙酯上清液（含0.25g初始样品）到另一试管（避免触及下层水相！如果

移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60-70 °C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品提取液，转速涡旋振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：4.0

2）鱼/虾/肉（牛肉/鸡肉/猪肉）：可用于五合一前处理方法

（1）    称取1g匀浆样品加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCl和20µL50 mM 2-硝基苯甲醛，涡旋震荡30秒；

（2）    50°C恒温培养3h，培养期间，每1h振荡5秒；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，涡旋震荡振荡30s；

（4）    室温下（20-25℃）4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品)到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），如果出现乳化现象，上清液不足3mL，请85℃水浴3分钟。在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；（注：肝脏组织富含脂肪、色素等，为防止乳化现象，建议选用4mL正己烷溶解，涡旋震荡30秒后，再进行下一步操作）

（7）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡1分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

注意：为了避免过高的背景值，建议用空白样品做平行，从取3ml乙酸乙酯上清旋转蒸发开始。

稀释倍数：2.0

3）鸡蛋【伏马毒素检测试剂盒】

（1）    称取1g鸡蛋样品加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡30秒；

（2）    50°C恒温培养3小时，在培养期间，每1h振荡5秒；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，涡旋震荡振荡30s；

（4）    室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60-70℃减压蒸馏或60-70℃氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品抽提工作液体，剧烈振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

注意：为了避免过高的背景值，建议用空白样品做平行，从取3ml乙酸乙酯上清旋转蒸发开始。

4）蜂蜜

（1）    称取1g蜂蜜加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（2）    50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；

（4）    室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

5）牛奶

（1）    对于含脂牛奶，取待测牛奶样品3ml室温4000g，5min。除去上层脂肪层。（对于脱脂奶粉，次步略）

（2）    取1ml样品，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（3）    50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

     稀释倍数：2.0

6）血清【伏马毒素检测试剂盒】

（1）        称取1g血清加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（2）        50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）        加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；

（4）        室温下4000g离心10分钟；

（5）        取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移

取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）        用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）        加入1mL1×样品提取液，剧烈

（8）        振荡2分钟；

（9）        室温下4000g离心10分钟；

（10）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

     稀释倍数：2.0

7）尿样

（1）    取3ml尿样，4000g离心5min。

（2）    离心后称取1ml，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（3）    50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；

（5）    室温下4000g离心10分钟；

（6）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（7）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（8）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；

（9）    室温下4000g离心10分钟；

（10）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

检测步骤

试剂的准备

注意：试剂在使用之前要在室温下解冻1-2小时，确定在使用前阅读过注意事项。准备适量的检测用试剂，所有的试剂摇匀后使用。准备足够所有小管所需的用量，不能将试剂倒回原来的瓶子中，处理试剂时建议用废弃的瓶子以降低污染的风险。

1x洗液的制备

1体积的20x洗液同19体积的蒸馏水混合

检测

\以下为计算份量的表格，用户可根据自己的需要来确定需要配置多少试剂。

（1）    加入100mL的标准品于所设定的孔中；

（2）    加入100mL的样品于所设定的孔中

（3）    在每孔中加入50mL 1×SEM-HRP，轻敲微孔板边缘混匀1分钟；

（4）    室温（22.5±2.5）°C避光孵育30分钟；

（5）    洗板3次，每次应该加入250mL 1×洗液，*后一次使板尽量甩干并在吸水纸上吸干；

（6）    每孔加入100mL的TMB底物；

（7）    在室温（22.5±2.5）°C避光孵育20分钟后，每孔加入100mL的终止液终止反应;

（8）    在450nm或450/650nm下读OD值 (读数前，用吸水纸将板底部的指痕和水分擦去，避免影响读数)。

10．结果计算【伏马毒素检测试剂盒】

（1）    分别计算标准、质控和样品的平均吸光度值和相对吸光度值。

相对吸光度值 (%) = (标准或样品吸光度值/零标准吸光度值) ´ 100

（2）    以相对吸光度值为纵坐标，标准浓度为横坐标建立标准曲线。

（3）    从标准曲线上读取质控和样品的浓度值。

（4）    样品检测下限计算方法如下：

样品检测下限 = (0.025ng/g) ´ (稀释倍数)

样品定量下限 = (0.1ng/g) ´ (稀释倍数)

例如，肉类样品的稀释倍数是2.0,那么肉类样品的检测下限是0.05ppb,定量检测下限是0.2ppb。

9236347  250mA Fuse sensor distribution Board              CNY                             

9236331  U-Block              CNY                             

9236142  Disposal Chute, straight, BR Rapid Plate                   CNY                             

9230755  Rechen Stirrer Rose 80             CNY                             

9235701  Cable 5V, RCS1                   CNY                             

9230433  Tubing Block              CNY                             

9235298  Plunger tip, syringe 500µl                  CNY                             

9235282  Grease, long term             CNY                             

9022809  Detect Barrel, QXA           CNY                             

9239554  ZLV EX Digital PCBA (1.5.7 Firmware)               CNY                             

9239553  Digital PCBA (1.5.7 Firmware)                   CNY                             

9238657  Main cable, centrifuge              CNY                             

9238630  Jumper, 2-channel             CNY                              【伏马毒素检测试剂盒】

9238620  Computer board Zent3, no Eprom            CNY                             

9242063  Evaporation trap, IQ/OQ, QS           CNY                             

9241890  QIArent&go - Rent out fee EZ1 XL            CNY                             

9241825  Pyro Q96 MDa, Full Agreement       The Full Agreement, PyM provides full service coverage for the PyroMark instrument. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes one on-site inspection service, with costs for labor ａnd parts covered. With a Full Agreement, there is a response time of 2 working days.         CNY                             

9241167  Board, LED scan, QX                  CNY                             

9241148  Transport lock, Y axis, M48               CNY                             

9241143  Application AUTOPURE (customized)                CNY                             

9241005  QIArent&go - Rent out fee BR Universal                   CNY                             

9240987  Kit, electronic, FFC-plugs, Qsym                CNY                             

9240980  Sensor, tray, sample tracking, Qsym                  CNY                             

9240945  Sensor, xy, portal, Qsym            CNY                             

9234856  Tubing coupling piece for washer liquid            CNY                             

9234852  Card, ISDN, Fritz PCI                  CNY                             

9240783  Update, Weigh Cell, AP96                  CNY                             

9240774  Assy, Transfer Rack, AP96                  CNY                             

9241632  LED Light System, AP                 CNY                              【伏马毒素检测试剂盒】

9241369  Temperature Controller, EZ1a                   CNY                             

9243645  Guided Valid Support, QIA Extraction Sys         The QIAGEN Other Extraction System Guided Validation Support service includes all travel ａnd labor charges for a site visit up to 2 days by a QIAGEN Specialist.  A QIAGEN specialist will provide an introduction to QIAGEN extraction chemistry utilized in the process, review the appropriate Handbook ａnd User Manual, as well as hands-on chemistry ａnd instrument operation as required.  The Guided Validation service includes experimental design consultation, internal validation documentation support, ａnd QIAGEN sponsored data templates.  The QIAGEN Specialist will also aide the customer in running some samples to initiate the validation process.  Enough consumable chemistry ａnd accessories (QIAGEN or other vendors) should be purchased by the customer to cover the validation experimental design ａnd are not included in the cost of validation support. Please indicate which protocols to validate (Biosprint 96, DNA mericon)         CNY                             

9243542  BR MDx, PM Service        "Service response time (repair): not applicable

Periodic inspection/maintenance: yes

Inspection/maintenance delivery: onsite

Cost coverage for Repair Parts : not included

Cost coverage for labor: yes, full coverage

Cost coverage for travel: yes, full coverage

Replacement system (Loaner) provision: not applicable

Transportation cost coverage: yes, full coverage"  CNY                             

9243305  Power Cord, India             CNY                             

QY-x2383 人膀胱移行细胞癌细胞T-24                                                       

QY-x2384 人结肠癌细胞SW620                                                  

QY-x2385 人甲状腺鳞癌细胞SW579                                                  

QY-x2386 人结肠癌细胞SW[SW-]                                                 【伏马毒素检测试剂盒】

QY-x2387 猪睾丸细胞系ST                                                  

QY-x2388 小鼠骨髓瘤细胞SP2/0                                                 

QY-x2389 人肝癌细胞SMMC-7721                                                      

QY-x2390 人卵巢癌细胞SK-OV-3                                                 

QY-x2391 人肝癌细胞SK-HEP-1                                                   

QY-x2392 人乳腺腺癌细胞SK-BR-3                                                     

QY-x2393 人子宫颈鳞癌细胞SiHa                                                       

QY-x2394 人胶质瘤细胞SHG-44                                                 

QY-x2395 人胃癌SGC7901                                                   

QY-x2396 人成骨肉瘤细胞Saos-2                                               

QY-x2397 大鼠雪旺细胞RSC96                                                    

QY-x2398 小鼠前列腺癌细胞RM-1                                                     

QY-x2399 人结肠腺癌细胞RKO                                                   

QY-x2400 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞RF/6A                                                     

QY-x2401 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7                                                

QY-x2402 人Burkitt＇s淋巴瘤细胞Raji                                                 【伏马毒素检测试剂盒】

QY-x2403 人肝细胞QSG-7701                                                      

QY-x2404 猪肾细胞系PK-15                                                

QY-x2405 猪髋动脉内皮细胞PIEC                                                       

QY-x2406 前列腺癌细胞系PC-3                                                  

QY-x2407 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)PC-12                                              

QY-x2408 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化)PC-12                                              

QY-x2409 人胰腺癌细胞PANC-1                                                  

QY-x2410 逆转录病毒包被的NIH3T3细胞PA317                                                      

QY-x2411 小鼠骨髓瘤细胞P3/NSI/1-Ag-4【NS-1】                                                    

QY-x2412 鼠成纤维细胞系 NIH/3T3 询价 ATCC                                                    

QY-x2413 大鼠肾细胞 NRK 询价 ATCC                                                     

QY-x2414 人胃癌细胞 NCI-N87 [N87] 询价 ATCC                                                    

QY-x2415 人Burkitt＇s淋巴瘤细胞 NAMALWA 询价 ATCC