高回收率(75%-105%)，多种样品的低成本提取方法；高重复性；检测过程只需要不到1.5小时；五合一处理方法更省时、经济、环保。

产品概述

雌酮(E1)检测试剂盒酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，含有雌酮(E1)检测试剂盒(SEM)的抗体已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同SEM-HRP共同被添加到板孔中。如果样品中含有SEM，会竞争SEM抗体，抑制SEM-HRP与板上包被的抗体结合。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中SEM的浓度成反比。

 试剂盒组成

已包被的酶标板（可拆式）                                            12×8 孔

标准液（0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4ppb）                              6×2.0mL

回收用10ppb(Spiking)——可选                                        1×0.8ml

HRP酶标抗原(HRP-Conjugated)                                         1×6mL

10×样品提取液(Sample Extraction Buffer)                             1×25mL

20×浓缩洗液(Wash Solution)                                          1×30mL

终止液(Stop Buffer)                                                  1×20mL

TMB底物(TMB Substrate)                                               1×10mL

50mM 2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)                               1×1.8mL

本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存，有效期为一年。如果超过3个月不使用试剂盒，

请将SEM-HRP酶标抗原放置-20℃或者冰冻保存。

检测试剂盒以外需要提供的设备或材料

1)      酶标仪(450 nm)

2)      恒温培养箱

3)      匀浆器

4)      蒸干器

5)      漩涡振荡器

6)      移液枪(50，100mL，1mL各一支)

7)      多道移液器（50-300mL）

8)      乙酸乙酯

9)      0.1M K₂HPO₄

10) 正己烷

注意事项

实验前请阅读以下文字，以保证获得*佳实验效果。

1)      标准品中含有雌酮(E1)检测试剂盒，请小心使用。

2)      不要使用过期的试剂盒。

3)      不同批次的试剂盒不要混用，抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。

4)      尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。

5)      水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。

6)      加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。

7)      孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。

8)      从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。

9)      将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。

样品的准备【雌酮(E1)检测试剂盒】

确保样品的正确保存，一般来说，样品在2-4只能保存1-2天，如果要保存更长时间，就要保存在-20冷冻保存，在用之前需要将冷冻的样品在室温下或冰箱内解冻。

1×样品提取液

按1：9的比例配制样品提取浓缩液和双蒸馏水。

1）饲料（用于检测添加到饲料中的鱼粉、虾粉或动物组织的SEM）

（1）    取0.5g匀质样品，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCl和20 µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，涡旋振荡1min；

（2）    50°C恒温培养3小时，在培养期间，每1h振荡5秒；

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，转速涡旋震荡1min；

（4）    室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL乙酸乙酯上清液（含0.25g初始样品）到另一试管（避免触及下层水相！如果

移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60-70 °C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品提取液，转速涡旋振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：4.0

2）鱼/虾/肉（牛肉/鸡肉/猪肉）：可用于五合一前处理方法

（1）    称取1g匀浆样品加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCl和20µL50 mM 2-硝基苯甲醛，涡旋震荡30秒；

（2）    50°C恒温培养3h，培养期间，每1h振荡5秒；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，涡旋震荡振荡30s；

（4）    室温下（20-25℃）4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品)到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），如果出现乳化现象，上清液不足3mL，请85℃水浴3分钟。在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；（注：肝脏组织富含脂肪、色素等，为防止乳化现象，建议选用4mL正己烷溶解，涡旋震荡30秒后，再进行下一步操作）

（7）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡1分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

注意：为了避免过高的背景值，建议用空白样品做平行，从取3ml乙酸乙酯上清旋转蒸发开始。

稀释倍数：2.0

3）鸡蛋【雌酮(E1)检测试剂盒】

（1）    称取1g鸡蛋样品加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡30秒；

（2）    50°C恒温培养3小时，在培养期间，每1h振荡5秒；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，涡旋震荡振荡30s；

（4）    室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60-70℃减压蒸馏或60-70℃氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品抽提工作液体，剧烈振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

注意：为了避免过高的背景值，建议用空白样品做平行，从取3ml乙酸乙酯上清旋转蒸发开始。

4）蜂蜜

（1）    称取1g蜂蜜加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（2）    50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；

（4）    室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

5）牛奶

（1）    对于含脂牛奶，取待测牛奶样品3ml室温4000g，5min。除去上层脂肪层。（对于脱脂奶粉，次步略）

（2）    取1ml样品，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（3）    50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；室温下4000g离心10分钟；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；

（8）    室温下4000g离心10分钟；

（9）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

     稀释倍数：2.0

6）血清【雌酮(E1)检测试剂盒】

（1）        称取1g血清加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（2）        50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（3）        加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；

（4）        室温下4000g离心10分钟；

（5）        取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移

取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（6）        用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（7）        加入1mL1×样品提取液，剧烈

（8）        振荡2分钟；

（9）        室温下4000g离心10分钟；

（10）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

     稀释倍数：2.0

7）尿样

（1）    取3ml尿样，4000g离心5min。

（2）    离心后称取1ml，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；

（3）    50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，转速振荡1min；

（5）    室温下4000g离心10分钟；

（6）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

（7）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；

（8）    加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；

（9）    室温下4000g离心10分钟；

（10）    每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

检测步骤

试剂的准备

注意：试剂在使用之前要在室温下解冻1-2小时，确定在使用前阅读过注意事项。准备适量的检测用试剂，所有的试剂摇匀后使用。准备足够所有小管所需的用量，不能将试剂倒回原来的瓶子中，处理试剂时建议用废弃的瓶子以降低污染的风险。

1x洗液的制备

1体积的20x洗液同19体积的蒸馏水混合

检测

\以下为计算份量的表格，用户可根据自己的需要来确定需要配置多少试剂。

（1）    加入100mL的标准品于所设定的孔中；

（2）    加入100mL的样品于所设定的孔中

（3）    在每孔中加入50mL 1×SEM-HRP，轻敲微孔板边缘混匀1分钟；

（4）    室温（22.5±2.5）°C避光孵育30分钟；

（5）    洗板3次，每次应该加入250mL 1×洗液，*后一次使板尽量甩干并在吸水纸上吸干；

（6）    每孔加入100mL的TMB底物；

（7）    在室温（22.5±2.5）°C避光孵育20分钟后，每孔加入100mL的终止液终止反应;

（8）    在450nm或450/650nm下读OD值 (读数前，用吸水纸将板底部的指痕和水分擦去，避免影响读数)。

10．结果计算【雌酮(E1)检测试剂盒】

（1）    分别计算标准、质控和样品的平均吸光度值和相对吸光度值。

相对吸光度值 (%) = (标准或样品吸光度值/零标准吸光度值) ´ 100

（2）    以相对吸光度值为纵坐标，标准浓度为横坐标建立标准曲线。

（3）    从标准曲线上读取质控和样品的浓度值。

（4）    样品检测下限计算方法如下：

样品检测下限 = (0.025ng/g) ´ (稀释倍数)

样品定量下限 = (0.1ng/g) ´ (稀释倍数)

例如，肉类样品的稀释倍数是2.0,那么肉类样品的检测下限是0.05ppb,定量检测下限是0.2ppb。

9001518  PyroMark Q24 Vacuum Workstation (220V)    For preparation of single stranded DNA template ready for sequencing by PyroMark Q24.(220V)      CNY                             

9001525  PyroMark Q96 ID     PyroMark Q96 ID instrument ａnd installation for performing pyrosequencing reactions.      CNY                             

4874004  PG AIV-H7 RT-PCR Kit (48)  Z          CNY                             

130912     NeXtal DWBlock MBClass II Suite             CNY                             

130909     NeXtal DWBlock pHClear Suite                  CNY                             

4831014  careTB PCR ASSAY             CNY                             

4834014  careCT PCR ASSAY             CNY                             

4834024  careCT PCR ASSAY             CNY                              【雌酮(E1)检测试剂盒】

4841024  pg HPV PCR ASSAY            CNY                             

130902     NeXtal DWBlock Classics L Suite                CNY                             

130816     NeXtal CubicPhase 3w Mo µplate (10)              CNY                             

4555003  artus M.tuberculosis LC PCR Kit (24) RUO                 CNY                             

130814     NeXtal CubicPhase 2w Mo µplate (10)              CNY                             

4518233  artus HCV RG RT-PCR Kit (24) RUO           CNY                             

4504105  artus Parvo B19 TM PCR Kit (96) RUO              CNY                             

120024     TurboFilter 96 Plates (24)                  CNY                             

4506366  artus HBV QS-RGQ Kit (72) CE          CNY                             

4509003  artus WNV LC RT-PCR Kit (24) RUO          CNY                             

120008     Elution Microtubes RS 24 x 96 Nonsterile polypropylene tubes (0.6 ml); 2304 in racks of 96. Includes caps   CNY                            

80404       AllPrep RNA Protein Kit (50)    50 AllPrep Mini Spin Columns, 50 RNeasy Mini Spin Columns, 50 Protein Cleanup Mini Spin Columns, Collection Tubes 1,5 ａnd 2,0 ml, RNase-Free Reagents ａnd Buffers ( Buffer APL, Buffer RLT, Buffer RW1, Buffer RPE ａnd RNase free water)   CNY                             

80004       AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit (50)  For 50 preps : Allprep DNA Spin Columns, Rneasy Spin Columns, Collection tubes, RNase-free Reagents, novel protein precipitation reagent    CNY                             

79237       Oligo-dt Primers (100 µl)          CNY                             

74404       RNeasy FFPE Kit (50)                  CNY                             

27104       QIAprep Spin Miniprep Kit (50)        For 50 high-purity plasmid minipreps: 50 QIAprep Spin Columns, Reagents, Buffers, Collection Tubes (2 ml)     CNY                              【雌酮(E1)检测试剂盒】

74116       RNeasy Mini QIAcube Kit (240)                 CNY                             

19781       QIAfilter Mega/Giga Cartridges (5) 5 QIAfilter Mega-Giga Cartridges, Buffer FWB        CNY                             

19570       Tape Pads (5)   Adhesive tape sheets for sealing multiwell plates ａnd blocks: 25 sheets per pad, 5 pads per pack         CNY                             

12662       HiSpeed Plasmid Maxi Kit (10)          10 HiSpeed Maxi Tips, 10 QIAfilter Maxi Cartridges, 10 QIAprecipitator Maxi Modules plus Syringes, Reagents, Buffers      CNY                             

10223       QIAGEN Genomic-tip 20/G      25 columns       CNY                             

133274     NeXtalStock PVP K15 (200)                CNY                             

133267     NeXtalStock PEG MME 350(200)              CNY                             

337622     qBiomarker SYBR Green Fluor Mastermix 12           CNY                             

337612     qBiomarker SYBR Green Mastermix (12)                  CNY                             

QYD610   猪副嗜血杆菌- 抗体检测ELISA    96孔/盒                                      

QYD611   猪轮状病毒- 抗体检测ELISA        96孔/盒                                      

QYD612   猪轮状病毒- 抗原检测ELISA        96孔/盒                                      

QYD613   反刍动物弓形虫抗体检测ELISA   96孔/盒                                      

QYD614   非洲猪瘟抗体检测试剂盒     96孔/盒                                      

QYD615   鲤鱼卵黄蛋白原试剂盒         96孔/盒                                      

QYD616   虹鳟鱼卵黄蛋白原试剂盒     96孔/盒                                      

QYD617   鲑科鱼卵黄蛋白原试剂盒     96孔/盒                                      

QYD618   斑马鱼卵黄蛋白原试剂盒     96孔/盒                                      

QYD619   青鳉鱼卵黄蛋白原试剂盒     96孔/盒                                      

QYD620   黑鱼卵黄蛋白原试剂盒         96孔/盒                                      

QYD621   麻痹性贝类毒素（PSP）试剂盒   96孔/盒                                      

QYD622   腹泻性贝类毒素（DSP）试剂盒  96孔/盒                                      

QYD623   健忘性贝类毒素（ASP）试剂盒  96孔/盒                                      

QYD624   组胺试剂盒     96孔/盒                                       【雌酮(E1)检测试剂盒】

QYD625   葡萄糖试剂盒         96孔/盒                                      

QYD626   果糖葡萄糖试剂盒         96孔/盒                                      

QYD627   氨氮试剂盒     96孔/盒                                      

QYD628   硝酸盐亚硝酸盐试剂盒         96孔/盒                                      

QYD629   维生素C试剂盒     96孔/盒                                      

QYD630   尿素试剂盒     96孔/盒                                      

QYD631   果糖试剂盒     96孔/盒                                      

QYD632   皮革水解蛋白试剂盒     96孔/盒                                      

QYD633   物种鉴定（孔测)试剂盒        96孔/盒                                      

QYD634   物种鉴定(管测)试剂盒  96孔/盒                                      

QYD635   多菌灵试剂盒         96孔/盒                                      

QYD636   氟乐灵试剂盒         96孔/盒                                      

QYD637   病毒DNA/RNA磁珠提取试剂盒   100次/盒                                             

QYD638   细菌基因组DNA磁珠提取试剂盒        100次/盒                                             

QYD639   禽流感病毒通用荧光定量RT-PCR检测试剂盒   48次/盒                                      

QYD640   禽流感H5亚型荧光定量RT-PCR检测试剂盒    48次/盒                                       【雌酮(E1)检测试剂盒】

QYD641   禽流感H7亚型荧光定量       48次/盒                                      

QYD642   禽流感H9亚型荧光定量RT-PCR检测试剂盒     48次/盒                                      

57704    QIAamp MinElute Virus Spin Kit (50)       For 50 minipreps: 50 QIAamp MinElute Columns, QIAGEN Protease, Carrier RNA, Buffers, Collection Tubes (2 ml)      CNY                           

929554  QX DNA Size Marker 50 bp-1,5 kb (100 µL)         CNY                            【鱼腥藻毒素a检测试剂盒】

764133  PAXgene Bone Marrow RNA Kit (30)      "For storage ａnd transport of bone marrow samples ａnd stabilization ａnd purification of intracellular RNA

Integrated system for storage, stabilization, ａnd purification

Immediate stabilization of intracellular RNA at collection

Rapid purification from heterogeneous bone marrow samples

Safe ａnd easy transportation"  CNY                           

762174  PAXgene Blood RNA Kit (50), CE           CNY                           

203646  HotStarTaq Plus Master Mix Kit (2500)  HotStarTaq Plus Master Mix Kits offer all the benefits of great specificity, sensitivity, ａnd performance as HotStarTaq Plus DNA Polymerase NOW in a ｍaster mix format, which offers even faster results ａnd added convenience.      CNY                           

203605  HotStarTaq Plus DNA Polymerase (1000)     4 x 250 units HotStarTaq Plus DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2   CNY                           

201443  Taq PCR Master Mix Kit (250)  3 x 1.7 ml Taq PCR Master Mix‡ containing 250 units Taq DNA Polymerase total, 3 x 1.7 ml distilled water   CNY                           

180964  GeneRead Gene Panel Mastermix (4.8 ml)          CNY                           

180485  GeneRead DNA Library L Amp Kit (100)              CNY                           

QYD544 莱克多巴胺金标快速检测卡Ractopaminel Rapid test kit     20T/盒                               【鱼腥藻毒素a检测试剂盒】

QYD545 三聚氰胺金标快速检测卡Melamine Rapid test kit 20T/盒                              

QYD546 志贺氏毒素检测试剂盒       96孔/盒                            

QYD547 金葡肠毒素检测试剂盒（分型）       96孔/盒                            

QYD548 金葡肠毒素检测试剂盒       96孔/盒                            

QYD549 沙门氏菌检测试剂盒    96孔/盒                            

QYD550 李斯特菌检测试剂盒    96孔/盒                            

QYD551 空肠弯曲菌检测试剂盒       96孔/盒                            

QYD552 沙门氏菌检测试剂盒    96孔/盒                            

QYD553 李斯特菌检测试剂盒    96孔/盒                            

QYD554 菌落总数定量计数板    96孔/盒                            

QYD555 大肠菌群定量计数板    96孔/盒                            

QYD556 金黄色葡萄球菌定量计数板       96孔/盒                            

QYD557 大肠杆菌定量计数板    96孔/盒                            

QYD558 大肠杆菌/大肠菌群定量计数板   96孔/盒                            

QYD559 酵母及霉菌定量计数板       96孔/盒                            

QYD560 肠杆菌定量计数板       96孔/盒                             【鱼腥藻毒素a检测试剂盒】

QYD561 沙门氏菌/肠杆菌定量计数板      96孔/盒                            

QYD562 大肠杆菌O157快速检测试剂盒       96孔/盒                            

QYD563 沙门氏菌快速检测试剂盒    96孔/盒                            

QYD564 李斯特菌快速检测试剂盒    96孔/盒                            

QYD565 沙门氏菌免疫胶体金试剂盒       96孔/盒                            

QYD566 大肠杆菌O157免疫胶体金试剂盒    96孔/盒                            

QYD567 单增李斯特菌免疫胶体金试剂盒       96孔/盒                            

QYD568 李斯特菌免疫胶体金试剂盒       96孔/盒                            

QYD569 弯曲杆菌免疫胶体金试剂盒       96孔/盒                            

QYD570 大肠杆菌肠毒素(VT1、VT2)免疫胶体金试剂盒      96孔/盒                            

QYD571 蜡样芽胞杆菌毒素免疫胶体金试剂盒       96孔/盒                            

QYD572 军团菌免疫胶体金试剂盒    96孔/盒                            

QYD573 新城疫ELISA试剂盒（NDV-Ab)       96孔/盒                            

QYD574 传染性法氏囊ELISA试剂盒（IBD-Ab)     96孔/盒                            

QYD575 传染性支气管炎ELISA试剂盒 （IBV-Ab）     96孔/盒                            

QYD576 病毒性关节炎ELISA试剂盒 （REO-Ab）      96孔/盒                             【鱼腥藻毒素a检测试剂盒】