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应用领域
具有Poly(A)-Tailing *功能的mRNA-ONLY™原核mRNA分离试剂盒提供了一种简单有效的方法:a)分离1小时内基本不含核糖体RNA(rRNA)的原核mRNA;b)分离的原核mRNA的3’-末端poly(A)尾部,用于后续操作或研究。仅mRNA试剂盒包括EPICENTRE的Terminator™5´-磷酸盐依赖性核酸外切酶,*是一种可消化的5´→3´核酸外切酶,可消化具有5´单磷酸的RNA。细菌的rRNA可以作为单转录物转录,然后加工生成具有5'单磷酸的rRNA,是该酶的底物。因此,具有Poly(A)拖尾的仅mRNA原核mRNA分离试剂盒可用于分离基本不含16S和23S rRNA的原核mRNA。
The mRNA-ONLY™ Prokaryotic mRNA Isolation Kit with Poly(A)-Tailing* provides a simple and effective method for a) isolating prokaryotic mRNA that is substantially free of ribosomal RNA (rRNA) in 1 hour; and b) 3´-end poly(A)-tailing of the isolated prokaryotic mRNA for subsequent manipulation or study. The mRNA-ONLY Kit includes EPICENTRE's Terminator™ 5´-Phosphate-Dependent Exonuclease,* a processive 5´→3´ exonuclease that digests RNA having a 5´ monophosphate. Bacterial rRNAs, which are transcribed as a single transcript and then processed to yield rRNAs with 5' monophosphates are substrates for the enzyme. Thus, the mRNA-ONLY Prokaryotic mRNA Isolation Kit with Poly(A) Tailing can be used to isolate prokaryotic mRNA substantially free of 16S and 23S rRNA.
仅mRNA试剂盒还包括EPICENTRE的Poly(A)聚合酶,该酶使用ATP作为底物,将模板磷酸单磷酸腺苷独立地添加到RNA分子的3′-羟基末端。从总RNA混合物中去除rRNA大大提高了poly(A)拖尾反应的效率(图1)。然后将所得的聚腺苷酸化的mRNA用于下游应用,例如cDNA合成和基因表达分析。
The mRNA-ONLY Kit also includes EPICENTRE's Poly(A) Polymerase which uses ATP as a substrate for template-independent addition of adenosine monophosphates to the 3´-hydroxyl termini of RNA molecules. Removal of rRNA from the total RNA mixture greatly increases the efficiency of the poly(A)- tailing reaction (Fig. 1). The resulting polyadenylated mRNA can then be used for downstream applications like cDNA synthesis and gene expression analysis.
优势说明
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