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标题ELISA实验中酶标仪校正程序-齐一生物

   

提供者:齐一生物科技(上海)有限公司    发布时间:2016/8/18   阅读次数:167次 >>进入该公司展台
 ELISA实验酶标仪校正程序
滤光片波长精度检查:将不同波长的滤光片从酶标仪上卸下,用 UV-2201 型紫外-可见分光光度计(波长 精度±0.3nm)于可见光区对每个滤光片进行扫描,其检测值与标定值之差为滤光片波长精度。
通道差与孔间差检测:通道差检测是取一只酶标板小孔杯(杯底须光滑,透明,无污染以酶标板架作载 体, 将其(内含 200ul 甲基橙溶液吸光度调至 0.500A 左右)置于 8 个通道的相应位置,蒸溜水调零,1 于 490nm 处连续测三次,观察其不同通道的检测器测量结果的一致性,可用极差值来表示。孔间差的测量是 选择同一厂家,同一批号酶标 2 板条(8 条共 96 孔)分别加入 200ul 甲基橙溶液(吸光度调至 0.100A 左 右)先后置于同一通道,蒸溜水调零,于 490nm 处检测,其误差大小用±1.96s 衡量。 n 零点飘移(稳定性观察):取 8 只小孔杯分别置于 8 个通道的相应位置,均加入 200ul 蒸溜水并调零, 于 490nm 处每隔 30 分钟测一次,观察各个通道 4 小时内吸光度的变化。

ELISA实验酶标仪校正程序 精密度评价:每个通道 3 只小杯分别加入 200ul 高中低 3 种不同.浓度的甲基橙溶解,蒸溜水调零,于 490nm 作双份平行测定,每日测二次(上下午各一次),连续测定 20 天。分别计算其批内精密度,日内批 精密度,日间精密度和总精密度及相应的 CV 值。
线性测定:用电子天平精确称取甲基橙配制 5 个系列的溶液,于 490nm 平行测 8 次,取其均值。计算其 回归方程,相关系数及标准估计误差 s,并用±1.96s 表示样品测量的误差范围.双波长测定评价:取一分 甲基橙溶液,分别加入 3 种不同浓度的溶血液(测定波长为 490nm,校正波长为 585nm),先后于 8 个通道 检测,每个通道测 3 次,51 比较各组之间是否具有统计学差异,以考察双波长消除干扰组分的效果。
一般
ELISA实验酶标仪无 585nm 滤光片,可选用 550nm 或 630nm 滤光片。450nm 滤光片的检定选用普鲁兰溶液(校 正波长为 630nm)

关键词:ELISA实验  

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