标题豚鼠低密度脂蛋白ELISA试剂盒-齐一生物现货供应

货号：QY-P40149
英文名称:Guinea Pig LDL ELISA Kit 

类别：酶联免疫分析检测试剂盒
规格：96T/48T
包装：盒

检测原理：采用双抗夹心法

保质期：六个月

产品保存条件：2-8°C

应用范围：仅供科研研究实验使用

样品形式：血清/血浆/组织匀浆/细胞培养上清/其它生物液体（具体情况请咨询）

标本的采集及保存

1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存  过程 中  如有沉淀形成，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

3.尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。  检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以 使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

标本要求： 

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

试剂盒组成：

48孔配制：

1. 说明书: 1份

2. 封板膜:  2片（48）

3. 密封袋:  1个

4  酶标包被板: 1×48 (2-8℃保存)

5. 标准品:    0.5ml×1瓶(2-8℃保存)

6. 标准品稀释液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)

7. 酶标试剂:     3 ml×1瓶(2-8℃保存)

8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)

9. 显色剂A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)

10 .显色剂B液：  3 ml×1瓶(2-8℃保存)

11 .终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)

12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)

96孔配置：

1.  说明书:1份

2.  封板膜:2片（96）

3.  密封袋: 1个

4.  酶标包被板:1×96 (2-8℃保存)

5.  标准品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)

6.  标准品稀释液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)

7.  酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)

8.  样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)

9.  显色剂A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)

10. 显色剂B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)

11. 终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)

12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)

需要自备的试剂和器材

1.37℃恒温箱。

2.标准规格酶标仪。

3.精密移液器及一次性吸头

4.蒸馏水，

5.一次性试管

6.吸水纸

操作步骤

1、标准品的稀释：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为9mmol/L，6 mmol/L，3 mmol/L，1.5mmol/L， 0.75 mmol/L）。

2、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4、配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7、温育：操作同3。

8、洗涤：操作同5。

9、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 

10、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。具体请咨询在线客服，或者来电索要详细说明书！     齐一生物科技（上海）有限公司（www.qiyibio.com）主要经营进口原装Elisa试剂盒，自产品牌QIYBO试剂盒，并提供免疫分析相关试剂和检测试剂盒。种类齐全，价格实惠，凡购买我公司产品的新老客户，即可享免费代测实验服务，可检测人源，小鼠，大鼠，猪，狗，猴，兔，羊，鸡，牛，鸭子，鱼，植物，昆虫等各种种属样本。全程提供技术支持。如需其他Elisa试剂盒说明书及报价，可来电咨询我公司! 

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