您的位置:首页 > 技术文献 > 产品说明 > 钙依赖性细胞黏附分子(E、N、P -Cadherin)ELISA试剂盒
1仔细阅读说明书
2确定试剂盒在有效期内
3按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)
4标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存
5准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等
6根据检测标本数量确定所需试剂的量
7按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂
DIY夹心法ELISA常见技术指南
8选择抗体时最好选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;最好从同一家公司选择抗体对。
9ELISA实验中为了确定最佳信号和最低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
10标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
11一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
12为了优化灵敏度,建议过夜孵育标准品和标本。
13若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
14当测定混合液体中的抗原时,如血清,建议在标本稀释液中加不相干的Ig.
注意事项
1.此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。
2.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。
3.保存于2-8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。
4.浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟
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