上海仁捷生物人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)
elisa试剂盒实验前样本的处理方法在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟后、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成、应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂、混合10-20分钟后、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3.尿液:用无菌管收集、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成、应再次离心、胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时、用无菌管收集、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清。
5.培养细胞:检测细胞内的成份时、用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液、细胞浓度达到100万/ml左右、通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂、以使细胞破坏并放出细胞内成份、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:切割标本后、称取重量、加入一定量的PBS、PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用、标本融化后仍然保持2-8℃的温度、加入一定量的PBS(PH7.4)、或组织蛋白萃取试剂、用手工或匀浆器将标本匀浆化、离心20分钟左右(2000-3000转/分)、仔细收集上清、分装后一份待检测、其余冷冻备用。