标题氨基转移反应的定性鉴定

提供者：长沙骏逸实验仪器有限公司发布时间：2008/11/21 阅读次数：295次 >>进入该公司展台

一、实验目的
（1）学习一种鉴定氨基转移作用的简便方法及其原理；

（2）进一步掌握纸层析的原理和操作技术；

（3）了解氨基转移作用在中间代谢中的意义。

二、实验原理
氨基移换酶也称转氨酶,它能催化α-氨基酸的氨基与α-酮酸的α-酮基互换，这种作用称为氨基移换作用。它在生物体内蛋白质的合成与分解等中间代谢中，在糖、脂肪、蛋白质三类物质代谢的相互联系、相互转化上，都起着很重要的作用。任何一种氨基酸进行转氨作用时，都由其专一的转氨酶催化。它们的最适pH接近7.4。在各种转氨酶中，以谷氨酸—草酰乙酸转氨酶（简称谷草转氨酶、GOT）及谷氨酸—丙酮酸转氨酶（简称谷丙转氨酶、GPT）活力最强。

三、试剂与器材
解剖器具、离心机、恒温水浴、干燥箱、台秤、层析系统等。

1/15mol/L磷酸缓冲液（pH=7.4）、1%谷氨酸溶液（用KOH中和至中性）、1%丙酮酸溶液（用KOH中和至中性）、0.1%碳酸氢钾溶液、0.05%碘乙酸溶液、15%三氯醋酸溶液、标准丙氨酸溶液(0.1%)、标准谷氨酸溶液(0.1%)、0.1%水合茚三酮乙醇溶液、酚溶剂。

四、操作方法
将兔击晕，迅速解剖，取出肝脏，在低温条件下剪碎。称取匀浆后，离心取上清液，即为制备的酶液。体外氨基移换反应。纸上层析法检查每人4个点（标准丙氨酸溶液、标准谷氨酸溶液、对照上清液、样品上清液）。点样放入层析罩内。用被酚所饱和的水溶液，平衡后，用带小漏斗的玻璃管从层析罩上加饱合酚试剂25ml于层析缸内。然后，立即盖紧塞子，当溶剂前沿达到距滤纸上端约2.5cm处，取出滤纸，晾干或吹干，以除去酚溶剂，喷洒0.1%茚三酮乙醇溶液，放入烘箱中显色氨基酸与茚三酮反应，在滤纸上呈现紫红色斑点。

五、关键步骤与注意事项

① 取动物新鲜组织制备酶液，防止酶失活。

② 加碘乙酸抑制酶解作用。

以上资料由www.xiangyikj.com 长沙骏逸实验仪器有限公司转载提供，供您学习参考！

长沙骏逸实验仪器有限公司是专业生产制造离心机、实验室仪器的高科技企业。公司拥有一批经验丰富的高级工程技术人员，专业从事实验室仪器的设计、开发和生产。公司生产、技术骨干均是多年从事实验仪器的精英。公司生产高速冷冻离心机;冷冻离心机;大容量离心机;高速离心机;低速离心机产品品种齐全，全系列离心机实现无刷化，技术先进、性能稳定、质量可靠。欢迎垂询!

地 址：湖南省长沙市望城坡 邮编： 410205
电话：0731-4742228

传真：0731-2641558

联系人：杨先生13574189676 loveself520@yahoo.com.cn

田先生13974991641 tkyong888@yahoo.com.cn

网址：www.xiangyikj.com

关键词：转氨酶氨基移换离心机

上一篇：台式高速离心机DNA酶切及凝胶电泳二下一篇：实验常用生物标本分离液的配制

该提供者的其它文献

版权声明

① 凡本网注明"来源：易推广"的所有作品，版权均属于易推广，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用。已获本网授权的作品，应在授权范围内

使用，并注明"来源：易推广"。违者本网将追究相关法律责任。

② 本信息由注册会员：长沙骏逸实验仪器有限公司发布并且负责版权等法律责任。

阅读排行榜

手写达人

猜您喜欢

推荐阅读

标题氨基转移反应的定性鉴定

相关文章

该提供者的其它文献

版权声明