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“上海沪鼎”文献:板蓝根与抗内毒素药效作用及化学基础研究
常晓波(汉中三二0一医院,陕西 汉中 723000)
[摘 要] 目的:探讨板蓝根抗内毒素的作用效果。方法:两组均通过板蓝根处理小鼠腹腔巨噬细胞,试验组另使用LPS刺激,观察TNF-α和IL-6的产生情况。结果:板蓝根预处理小鼠腹腔巨噬细胞能明显降低TNF-α和IL-6的量(P<0.05),抑制率有差异。结论: 板蓝根抗内毒素作用效果明显。
[关键词] 板蓝根;内毒素;巨噬细胞;LPS;TNF-α;IL-6
板蓝根是十字花科植物菘蓝的根,是临床上常用的清热解毒的中药,具有抗菌、抗病毒、抗癌、增强免疫力、抗细菌内毒素等多种功能[1]。肿瘤坏死因子TNF-α、白细胞介素-6(IL-6)等, 进而引起机体发热、休克、血管内弥散性凝血等反应,对患者造成严重的损伤,甚至死亡。以小鼠腹腔巨噬细胞作为对象,研究板蓝根对LPS刺激产生TNF-α和IL-6的作用,现将结果报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料:①试剂:板蓝根购于辽宁中医药大学中药房,
LPS(湛江安度斯生物有限公司,010203),小鼠TNF-αELISA 试剂盒( 江莱生物科技有限公司, 货号: ELISA 2266 ), 小鼠IL-6 ELISA试剂盒(上海沪鼎生物科技有限公司,HD-
30163k)。②实验动物:周龄4周的昆明小鼠,20 g左右,雌雄各15只,均购于北京维通利华有限公司。
1.2实验方法
1.2.1小鼠腹腔巨噬细胞的制备:给予昆明小鼠腹腔注射2 mg/ 只BCG,4 d后经过脱颈椎处死小鼠,给小鼠腹腔注射5 ml含有100 U/ml青霉素、100 μg/ml链霉素和10 U/ml肝素的RPMI160
(GIBCO)培养液,轻柔腹部,抽取腹腔液体,1 500 r/min,
5 min, 用RPMI 160 洗涤细胞两次, 接种于含10 % 胎牛血清
(Hyclone)的RPMI160培养液,于37℃,5% O2,95% CO2的培养箱(Thermo)中进行培养2 h,洗去未贴壁的细胞,剩下的贴壁细胞即为巨噬细胞。
1.2.2板蓝根溶液的配置:取100 g板蓝根置于700 ml蒸馏水煎煮
1.5 h,滤渣加500 ml蒸馏水继续煎煮1 h,过滤,将所有滤液浓缩至100 ml。
1.2.3 分组处理:取2×106个细胞/ml至于24孔板,随机分为两组,5孔/组,其中板蓝根组每孔加1 ml板蓝根处理细胞1 h,然后加LPS至终浓度50 ng/ml,对照组不加板蓝根预处理,直接加LPS 处理,24 h后,取上清液用ELISA检测TNF-α和IL-6的含量,抑制率=(1-板蓝根处理组含量/对照组含量)×100%。
1.3 统计学处理: 使用SPSS 17 . 0 对各项资料进行统计、分析, 各项参数以均数±标准差( x s ) 表示, 采用t 和χ 2 检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
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