ELISA试剂盒的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶符号。结合在固相载体外表的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶符号的抗原或抗体既保存其免疫学活性，又保存酶的活性。ELISA试剂盒在测定时，受检标本（测定其间的抗体或抗原）与固相载体外表的抗原或抗体起反响。
用洗刷的办法使固相载体上构成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分隔。再参加酶符号的抗原或抗体，也经过反响而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈必定的份额。参加酶反响的底物后，底物被酶催化成为有色产品，产品的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色。
使用双抗体夹心法测定标本中人可溶性粘附分ELISA试剂盒水平。用纯化的人可溶性粘附分ELISA试剂盒抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次参加可溶性粘附分ELISA试剂盒，再与HRP符号的可溶性粘附分ELISA试剂盒抗体结合，构成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过完全洗刷后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终究的黄色。色彩的深浅和样品中的可溶性粘附分ELISA试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），经过规范曲线核算样品中人可溶性粘附分浓度。
