标题脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）试剂盒-齐一生物

For Research Use only

仅供研究用

货号：QYS-232001

紫外分光光度法：50 管/48 样

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

DHAR 存在于细胞质、线粒体和叶绿体中。DHAR 催化 GSH 还原 DHA 生成 AsA 和 GSSG，调控细胞 AsA/DHA 比值，是抗坏血酸-谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶。提高植物体内的DHAR  活性，可提高植物食品中 AsA 含量，进而提高植物食品的营养品质。

测定原理：

DHAR 催化 GSH 还原 DHA 生成 AsA，通过测定 DHA 减少速率，计算 DHAR 活性。

实验中所需仪器及设备：

研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液器和蒸馏水。

试剂组成和配制：

粗酶液提取：

1. 按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10⁴ 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议

500 万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；8000g 4℃离心 20min，取上清液置冰上混匀待测。

3.血清等液体：直接测定。

DHAR 测定操作：

DHAR 活性计算公式：

(1).  按蛋白浓度计算

(2).  按样本质量计算

(3).  按细胞数量计算

（4）按液体体积计算

注意事项：

临用前配制的试剂未使用完的 4℃保存，3 天内使用完。

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