elisa试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的运用，但操作中的各个环节对试验的查看效果影响较大，如不留心，有或许致使显色不全、花板等效果。我将操作中各个环节常呈现疑问的要素及解决办法总结于下，以期给同行带来一些启示，前进试验质量。
下面分析Elisa试验操作中或许影响效果的要素，并给出相应的解决办法
1 选择试剂 选择质量优异的查看试剂，严峻依照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样 或许要素： 1）血清或血浆标本分别欠好即进行加样； 2）手工操作中，加样板过多构成加样后放入孵箱前等待时间过长（特别是室内温度较高时）； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外。解决办法： 1） 标本为血清：最好将血液先天然寄存1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：有必要运用含抗凝剂的血液标本搜集管，采血后有必要当即倒置采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内查看，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 2） 加样后及时放入孵箱。 3） 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4） 假设选用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理
仪器加酶试剂。 5） 标本较多时，请分批操作。
3 孵育 或许要素： 1） 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸腾，吸附于孔壁，难于清洁彻底； 2） 孵育时间人为延伸，致使非特异性联系紧附于反响孔周围，难以清洁彻底。解决办法： 1） 贴封片或加盖； 2） 按说明进程严峻操控操作时间。
4 洗板 或许要素： 1） 选用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2） 选用半自动洗板机洗板时，洗液量缺乏，致使洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不彻底；洗板不畅，致使洗板效果差。 3） 反响板过多构成洗板等待时间长。 解决办法： 1） 保证洗液注满各孔，洗板针疏通，洗完板后最好在吸水纸（选择洁净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 2） 合理安排，或多用几台洗板机。
5 显色 或许要素： 1） 显色剂制作后放置时间过长或运用过期显色剂； 2） 加显色剂时溅起孔外构成液体回流。解决办法： 1） 显色剂尽量在临用前制作，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2） 加样时坚持显色剂不外流； 3） A、B液应防止触摸金属器械。
6 中止 或许要素如加中止液时发作较多气泡，致使假阳性增加。所以在加中止液时应防止发作气泡。
7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在全部操作进程中保证酶标板不触摸次氯酸; 尽或许完成ELISA查看标准自动化，有用前进查看质量。
在实际操作中，除了选择优异试剂外，有必要严峻依照操作进程进行操作，一同作好室内质控、室间质评，以慎重的工作作风查看每一份标本，才华保证查看质量。现在国内已有恰当数量的单位具有全自动酶标仪，这对于完成ELISA标准化查看、前进查看质量起到了重要效果。
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