在
elisa试剂盒中通常有两次抗原抗体反响，即加标本和加试剂盒系物后。抗原抗体反响的完结需求有必定的温度和时刻，这一保温进程称为温育，有人称之为孵育，在ELISA试剂盒中似不恰当。
ELISA试剂盒属固相免疫测定，抗原、抗体的联系只在固相表面上发作。以抗体包被的夹心法为例，参加板孔中的标本，其间的抗原并不是都有均等的和固相抗结 合的时机，只需最靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体触摸。这是一个逐渐平衡的进程，因而需经扩散才干到达反响的结尾。在这以后参加的酶符号抗体与固相抗 原的联系也相同如此。这即是为什么ELISA反响老是需求必定时刻的温育。温育常选用的温度有43℃、37℃、室温和4℃等。37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体联系的合适温度。在树立ELISA办法作反响 动力学研讨时，实验表明，两次抗原抗体反响通常在37℃经1～2小时，产品的生成可达顶峰。为加快反响，可进步反响的温度，有些实验在43℃进行，但不宜 选用更高的温度。抗原抗体反响4℃更为彻底，在放射免疫测定中多使反响在冰箱中，以构成最多的沉积。但因所需时刻太长，在ELISA试剂盒中通常不予 选用。
保温的办法除有的
ELISA试剂盒仪器附有特制的电热块外，通常均选用水浴，可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度敏捷平 衡。为避免蒸腾，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此刻可让反响板漂浮在水面上。若用保温箱，ELISA试剂盒应放在湿盒内，湿盒要选用传 热性良好的资料如金属等，在盒底垫湿的纱布，最后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规则的温度，特别是在气温较低的时候更应如此。 无论是水浴仍是湿盒温育，反响板均不宜叠放，以确保各板的温度都能敏捷平衡。室温温育的反响，操作时的室温应严厉约束在规则的范围内，规范室温温度是指 20～25℃，但具体操作时可根据说明书的请求操控温育。室温温育时，ELISA试剂盒只需平置于操作台上即可。应留意温育的温度和时刻应按规则力求准 确。为确保这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板同时测定。
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