For Research Use Only
仅供研究用
货号:QYS-23061
植物类黄酮(Flavonoid)试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
类黄酮是一类多苯化合物,属于植物次生代谢物,对人体具有消炎,抗菌,降血脂,清除体内羟自由基,预防癌症等作用。
植物类黄酮(Flavonoid)试剂盒说明书测定原理
在碱性亚硝酸盐溶液中,类黄酮与铝离子形成在 502nm 处有特征吸收峰的红色络合物,测定样品提取液在 502nm 处的吸光值,即可计算样品类黄酮含量。
天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:60%乙醇,自备。
试剂一:液体 2mL×1 瓶,4℃保存。试剂二:液体 2mL×1 瓶,4℃保存。试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
类黄酮提取
将样本烘干至恒重,粉碎,过 40 目筛之后,称取约 0.02g,加入 2mL 提取液,60℃振荡提取 2h,10000g,25℃,离心 10min,取上清待测。
测定操作表
空白管测定管
样本待测液(µL)540
蒸馏水(µL)540
试剂一(µL)3030
混匀,25℃静置 6min
试剂二(µL)3030
混匀,25℃静置 5min
试剂三(µL)400400
混匀,25℃静置 15 min,测定 510nm 处吸光值。ΔA=A 测定-A 空白,空白管只要做一管。
类黄酮含量计算公式
标准曲线:y = 5.02x+0.0007,R2 = 0.9996 类黄酮含量(mg/g 干重)=(ΔA -0.0007)÷5.02×V 样÷(V 样÷V 样总×W)
= 0.398×(ΔA -0.0007)÷W
V 样总:加入提取液体积,2mL; V 样:反应中样品体积,0.54mL; W:样品质量,g
植物类黄酮(Flavonoid)试剂盒说明书最低检出限为 10µg/g。